• muid

Núicléas pulposus uath-logach curtha isteach i gcnámh fo-chondrach lumbar chun samhail ainmhíoch d'athruithe Modic a chruthú

Go raibh maith agat as cuairt a thabhairt ar Nature.com. Tá tacaíocht theoranta CSS ag an leagan brabhsálaí atá in úsáid agat. Chun na torthaí is fearr a fháil, molaimid brabhsálaí níos nuaí a úsáid (nó mód comhoiriúnachta a dhíchumasú in Internet Explorer). Idir an dá linn, chun tacaíocht leanúnach a chinntiú, taispeánfaimid an suíomh gan stíleanna ná JavaScript.
Is bunús tábhachtach chun MC a staidéar bunú samhlacha ainmhithe d'athrú modúil (MC). Roinneadh ceithre choinín bhána is caoga ón Nua-Shéalainn ina ngrúpa oibríochta bréige, grúpa ionchlannáin matáin (grúpa ME) agus grúpa ionchlannáin núicléas pulposus (grúpa NPE). Sa ghrúpa NPE, nochtadh an diosca idirveirteabrach trí chur chuige máinliachta lumbar anterolateral agus úsáideadh snáthaid chun corp veirteabrach L5 a tholladh in aice leis an pláta deiridh. Baineadh NP as an diosca idirveirteabrach L1/2 le steallaire agus instealladh isteach ann é. Druileáil poll sa chnámh fho-chondral. Bhí na nósanna imeachta máinliachta agus na modhanna druileála sa ghrúpa ionchlannáin matáin agus sa ghrúpa oibríochta bréige mar an gcéanna leo siúd sa ghrúpa ionchlannáin NP. Sa ghrúpa ME, cuireadh píosa matáin isteach sa pholl, agus sa ghrúpa oibríochta bréige, níor cuireadh aon rud isteach sa pholl. Tar éis na hoibríochta, rinneadh scanadh MRI agus tástáil bhitheolaíoch mhóilíneach. D'athraigh an comhartha sa ghrúpa NPE, ach ní raibh aon athrú soiléir comhartha sa ghrúpa oibríochta bréige ná sa ghrúpa ME. Léirigh breathnóireacht histeolaíoch gur breathnaíodh iomadú neamhghnácha fíocháin ag an suíomh ionchlannaithe, agus go raibh méadú ar léiriú IL-4, IL-17 agus IFN-γ sa ghrúpa NPE. Is féidir le hionchlannú NP isteach sa chnámh fochondral samhail ainmhíoch de MC a fhoirmiú.
Is iad athruithe Modic (MC) léasanna de na plátaí deiridh veirteabracha agus an smior cnámh in aice láimhe atá le feiceáil ar íomháú athshondais mhaighnéadaigh (MRI). Tá siad coitianta go leor i ndaoine a bhfuil comharthaí gaolmhara acu1. Tá béim curtha ag go leor staidéar ar thábhacht MC mar gheall ar a bhaint le pian íochtarach droma (LBP)2,3. Rinne de Roos et al.4 agus Modic et al.5 cur síos neamhspleách ar thrí chineál éagsúla neamhghnáchaíochtaí comhartha fochondral sa smior cnámh veirteabrach ar dtús. Is iad athruithe cineál I Modic ná hypointense ar sheichimh T1-ualaithe (T1W) agus hipir-dhian ar sheichimh T2-ualaithe (T2W). Nochtann an léas seo plátaí deiridh scoilte agus fíochán gráinnithe soithíoch in aice láimhe sa smior cnámh. Taispeánann athruithe cineál II Modic comhartha ard ar sheichimh T1W agus T2W araon. Sa chineál seo léas, is féidir scrios pláta deiridh a fháil, chomh maith le hathsholáthar sailleach histeolaíoch ar an smior cnámh in aice láimhe. Taispeánann athruithe cineál III Modic comhartha íseal i seichimh T1W agus T2W. Breathnaíodh léasanna sclerotic a fhreagraíonn do na plátaí deiridh6. Meastar gur galar paiteolaíoch an dromlaigh é MC agus tá dlúthbhaint aige le go leor galair dhíghiniúna an dromlaigh7,8,9.
I bhfianaise na sonraí atá ar fáil, thug roinnt staidéar léargas mionsonraithe ar chúis agus ar mheicníochtaí paiteolaíocha MC. Mhol Albert et al. gur féidir le MC a bheith mar thoradh ar herniation diosca8. Chuir Hu et al. MC i leith meathlú dian diosca10. Mhol Kroc an coincheap “réabadh diosca inmheánach,” a deir gur féidir le tráma diosca athchleachtach a bheith ina chúis le micrea-stróic sa phláta deiridh. Tar éis foirmiú scoilte, féadfaidh scriosadh an phláta deiridh ag an núicléas pulposus (NP) freagairt uath-imdhíonachta a spreagadh, rud a fhágann go bhforbraítear MC11 tuilleadh. Roinn Ma et al. dearcadh comhchosúil agus thuairiscigh siad go bhfuil ról lárnach ag uath-imdhíonacht spreagtha ag NP i pataigineas MC12.
Tá ról ríthábhachtach ag cealla an chórais imdhíonachta, go háirithe limficítí cúnta T CD4+, i bpaitigineas na huath-imdhíonachta13. Táirgeann an fo-thacar Th17 a aimsíodh le déanaí an cíteacín pró-athlastach IL-17, cuireann sé chun cinn léiriú ceimicíní, agus spreagann sé cealla T in orgáin damáistithe chun IFN-γ14 a tháirgeadh. Tá ról uathúil ag cealla Th2 freisin i bpaitigineas freagairtí imdhíonachta. Is féidir le léiriú IL-4 mar chill Th2 ionadaíoch iarmhairtí imdhíon-phaiteolaíocha tromchúiseacha a bheith mar thoradh air15.
Cé gur rinneadh go leor staidéar cliniciúil ar MC16,17,18,19,20,21,22,23,24, tá easpa samhlacha turgnamhacha ainmhithe oiriúnacha ann fós ar féidir leo aithris a dhéanamh ar an bpróiseas MC a tharlaíonn go minic i ndaoine agus is féidir a úsáid chun imscrúdú a dhéanamh ar an gcúis nó ar chóireálacha nua amhail teiripe spriocdhírithe. Go dtí seo, níor tuairiscíodh ach cúpla samhail ainmhithe de MC chun staidéar a dhéanamh ar na meicníochtaí paiteolaíocha bunúsacha.
Bunaithe ar an teoiric uath-imdhíonachta a mhol Albert agus Ma, bhunaigh an staidéar seo samhail shimplí agus in-athchruthaithe de chealla meitibileach coinín trí nanaipíneach a uath-thrasphlandú in aice leis an pláta deiridh veirteabrach druileáilte. Is cuspóirí eile iad tréithe histolaíocha na samhlacha ainmhithe a bhreathnú agus na meicníochtaí sonracha a bhaineann le nanaipíneach i bhforbairt chealla meitibileach a mheas. Chuige seo, úsáidimid teicnící ar nós bitheolaíocht mhóilíneach, MRI, agus staidéir histolaíocha chun dul chun cinn chealla meitibileach a staidéar.
Fuair ​​dhá choinín bás de bharr fuilithe le linn na máinliachta, agus fuair ceithre choinín bás le linn ainéistéise le linn scanadh MRI. Mhair na 48 coinín eile agus ní léirigh siad aon chomharthaí iompraíochta ná néareolaíocha tar éis na máinliachta.
Léiríonn MRI go bhfuil déine comhartha an fhíocháin atá leabaithe i bpoill éagsúla difriúil. D'athraigh déine comhartha an choirp veirteabraigh L5 sa ghrúpa NPE de réir a chéile ag 12, 16 agus 20 seachtain tar éis an ionchur (léirigh seicheamh T1W comhartha íseal, agus léirigh seicheamh T2W comhartha measctha móide comhartha íseal) (Fíor 1C), agus d'fhan cuma MRI an dá ghrúpa eile de chodanna leabaithe réasúnta cobhsaí le linn na tréimhse céanna (Fíor 1A, B).
(A) MRIanna seicheamhacha ionadaíocha de dhroim lumbar an choinín ag 3 phointe ama. Ní bhfuarthas aon neamhghnáchaíochtaí comhartha sna híomhánna den ghrúpa obráide bréige. (B) Tá tréithe comhartha an choirp veirteabraigh sa ghrúpa ME cosúil leo siúd sa ghrúpa obráide bréige, agus ní fheictear aon athrú suntasach comhartha ag an láthair leabaithe le himeacht ama. (C) Sa ghrúpa NPE, tá an comhartha íseal le feiceáil go soiléir sa seicheamh T1W, agus tá an comhartha measctha agus an comhartha íseal le feiceáil go soiléir sa seicheamh T2W. Ón tréimhse 12 seachtaine go dtí an tréimhse 20 seachtaine, laghdaíonn na comharthaí arda sporadacha timpeall ar na comharthaí ísle sa seicheamh T2W.
Is féidir hipearpláis chnámh soiléir a fheiceáil ag suíomh ionchlannaithe an choirp veirteabraigh sa ghrúpa NPE, agus tarlaíonn an hipearpláis chnámh níos tapúla ó 12 go 20 seachtain (Fíor 2C) i gcomparáid leis an ngrúpa NPE, ní fheictear aon athrú suntasach sna coirp veirteabracha samhaltaithe; grúpa Sham agus grúpa ME (Fíor 2C) 2A,B).
(A) Tá dromchla an choirp veirteabraigh ag an gcuid ionchlannaithe an-réidh, cneasaíonn an poll go maith, agus níl aon hipearpláis sa chorp veirteabrach. (B) Tá cruth an tsuímh ionchlannaithe sa ghrúpa ME cosúil leis an gceann sa ghrúpa obráide bréige, agus níl aon athrú soiléir ar chuma an tsuímh ionchlannaithe le himeacht ama. (C) Tharla hipearpláis cnámh ag an suíomh ionchlannaithe sa ghrúpa NPE. Mhéadaigh an hipearpláis cnámh go tapa agus shín sí fiú tríd an diosca idirveirteabrach go dtí an corp veirteabrach contralateral.
Tugann anailís histeolaíoch faisnéis níos mionsonraithe faoi fhoirmiú cnámh. Taispeánann Fíor 3 na grianghraif de na codanna iar-obráide atá daite le H&E. Sa ghrúpa obráide bréige, bhí na condrocytes eagraithe go maith agus níor braitheadh ​​aon iomadú cealla (Fíor 3A). Bhí an scéal sa ghrúpa ME cosúil leis an scéal sa ghrúpa obráide bréige (Fíor 3B). Mar sin féin, sa ghrúpa NPE, breathnaíodh líon mór condrocytes agus iomadú cealla cosúil le NP ag an suíomh ionchlannaithe (Fíor 3C);
(A) Is féidir trabeculae a fheiceáil gar don phláta deiridh, tá na condrocytes eagraithe go néata le méid agus cruth aonfhoirmeach na gcealla agus gan aon iomadú (40 uair). (B) Tá riocht an tsuímh ionchlannaithe sa ghrúpa ME cosúil le riocht an ghrúpa bréige. Is féidir trabeculae agus condrocytes a fheiceáil, ach níl aon iomadú soiléir ag an suíomh ionchlannaithe (40 uair). (B) Is féidir a fheiceáil go bhfuil condrocytes agus cealla cosúil le NP ag iomadú go suntasach, agus tá cruth agus méid na condrocytes míchothrom (40 uair).
Breathnaíodh léiriú mRNA interleukin 4 (IL-4), mRNA interleukin 17 (IL-17), agus mRNA interferon γ (IFN-γ) sa ghrúpa NPE agus ME araon. Nuair a rinneadh comparáid idir leibhéil léiriú na ngéinte sprice, bhí méadú suntasach ar léiriú géine IL-4, IL-17, agus IFN-γ sa ghrúpa NPE i gcomparáid le léiriú géine an ghrúpa ME agus an ghrúpa oibríochta bréige (Fíor 4) (P < 0.05). I gcomparáid leis an ngrúpa oibríochta bréige, níor mhéadaigh leibhéil léiriú géine IL-4, IL-17, agus IFN-γ sa ghrúpa ME ach beagán agus níor shroich siad athrú staitistiúil (P > 0.05).
Léirigh léiriú mRNA IL-4, IL-17 agus IFN-γ sa ghrúpa NPE treocht i bhfad níos airde ná iad siúd sa ghrúpa oibríochta bréige agus sa ghrúpa ME (P < 0.05).
I gcodarsnacht leis sin, ní raibh aon difríocht shuntasach sna leibhéil léirithe sa ghrúpa ME (P>0.05).
Rinneadh anailís blot Thiar ag baint úsáide as antashubstaintí atá ar fáil go tráchtála i gcoinne IL-4 agus IL-17 chun an patrún athraithe léirithe mRNA a dhearbhú. Mar a thaispeántar i bhFíor 5A,B, i gcomparáid leis an ngrúpa ME agus an grúpa oibríochta bréige, bhí méadú suntasach ar leibhéil próitéine IL-4 agus IL-17 sa ghrúpa NPE (P < 0.05). I gcomparáid leis an ngrúpa oibríochta bréige, theip ar leibhéil próitéine IL-4 agus IL-17 sa ghrúpa ME athruithe suntasacha ó thaobh staitisticí de a bhaint amach ach an oiread (P> 0.05).
(A) Bhí leibhéil próitéine IL-4 agus IL-17 sa ghrúpa NPE i bhfad níos airde ná iad siúd sa ghrúpa ME agus sa ghrúpa phlaicéabó (P < 0.05). (B) Histogram blot Thiar.
Mar gheall ar an líon teoranta samplaí daonna a fuarthas le linn obráide, tá sé deacair staidéir shoiléire agus mhionsonraithe a dhéanamh ar phaitigineas MC. Rinneamar iarracht samhail ainmhíoch de MC a bhunú chun a mheicníochtaí paiteolaíocha féideartha a imscrúdú. Ag an am céanna, baineadh úsáid as meastóireacht radaiolaíoch, meastóireacht histolaíoch agus meastóireacht bhitheolaíoch mhóilíneach chun cúrsa MC arna spreagadh ag uathgraft NP a leanúint. Mar thoradh air sin, mar thoradh ar an tsamhail ionchlannáin NP, tháinig athrú de réir a chéile ar dhéine an chomhartha ó phointí ama 12 sheachtain go 20 seachtain (comhartha íseal measctha i seichimh T1W agus comhartha íseal i seichimh T2W), rud a léiríonn athruithe fíocháin, agus dheimhnigh na meastóireachtaí histolaíocha agus bitheolaíocha móilíneacha torthaí an staidéir radaiolaíoch.
Léiríonn torthaí an turgnaimh seo gur tharla athruithe amhairc agus histolaíochta ag suíomh sárú coirp veirteabraigh sa ghrúpa NPE. Ag an am céanna, breathnaíodh léiriú géinte IL-4, IL-17 agus IFN-γ, chomh maith le IL-4, IL-17 agus IFN-γ, rud a léiríonn gur féidir le sárú fíochán núicléas pulposus uathlógach sa chorp veirteabrach sraith athruithe comhartha agus moirfeolaíocha a chur faoi deara. Is furasta a fháil amach go bhfuil tréithe comhartha na gcorp veirteabrach sa mhúnla ainmhíoch (comhartha íseal sa seicheamh T1W, comhartha measctha agus comhartha íseal sa seicheamh T2W) an-chosúil le tréithe cealla veirteabracha daonna, agus dearbhaíonn tréithe MRI breathnuithe histolaíochta agus anatamaíochta comhlán freisin, is é sin, go bhfuil na hathruithe i gcealla an choirp veirteabraigh forásach. Cé gur féidir leis an bhfreagairt athlastach de bharr tráma géarmhíochaine teacht chun cinn go luath tar éis pollta, léirigh torthaí MRI gur tháinig athruithe comhartha a bhí ag méadú de réir a chéile chun cinn 12 sheachtain tar éis pollta agus gur mhair siad suas le 20 seachtain gan aon chomharthaí téarnaimh ná aisiompaithe ar athruithe MRI. Tugann na torthaí seo le fios gur modh iontaofa é NP veirteabrach uathlogach chun MV forásach a bhunú i gcoiníní.
Éilíonn an tsamhail pollta seo scileanna, am agus iarracht mháinliachta leordhóthanacha. I dturgnaimh réamhchéime, d’fhéadfadh díscaoileadh nó spreagadh iomarcach na struchtúr ligamentous paraveirteabrach a bheith ina chúis le foirmiú osteophytes veirteabracha. Ba chóir a bheith cúramach gan na dioscaí cóngaracha a mhilleadh ná a ghreannú. Ós rud é go gcaithfear doimhneacht an treá a rialú chun torthaí comhsheasmhacha agus in-athchruthaithe a fháil, rinneamar breiseán de láimh trí scáil snáthaide 3 mm ar fhad a ghearradh amach. Cinntíonn úsáid an bhreiseáin seo doimhneacht druileála aonfhoirmeach sa chorp veirteabrach. I dturgnaimh réamhchéime, fuair triúr máinlia ortaipéideach a bhí páirteach san oibríocht go raibh sé níos éasca oibriú le snáthaidí 16-thomhas ná le snáthaidí 18-thomhas nó modhanna eile. Chun fuiliú iomarcach a sheachaint le linn druileála, cuirfidh an tsnáthaid a choinneáil socair ar feadh tamaill poll iontrála níos oiriúnaí ar fáil, rud a thugann le fios gur féidir leibhéal áirithe de MC a rialú ar an mbealach seo.
Cé gur dhírigh go leor staidéar ar MC, is beag atá ar eolas faoi eiteolaíocht agus paitiniginéis MC25,26,27. Bunaithe ar ár staidéir roimhe seo, fuarthas amach go bhfuil ról lárnach ag uath-imdhíonacht i dtarlú agus i bhforbairt MC12. Rinne an staidéar seo scrúdú ar léiriú cainníochtúil IL-4, IL-17, agus IFN-γ, arb iad na príomhbhealaí difreála cealla CD4+ tar éis spreagadh antaigin. Inár staidéar, i gcomparáid leis an ngrúpa diúltach, bhí léiriú níos airde ar IL-4, IL-17, agus IFN-γ ag an ngrúpa NPE, agus bhí leibhéil próitéine IL-4 agus IL-17 níos airde freisin.
Go cliniciúil, méadaítear léiriú mRNA IL-17 i gcealla NP ó othair a bhfuil herniation diosca orthu28. Fuarthas leibhéil mhéadaithe léirithe IL-4 agus IFN-γ freisin i samhail herniation diosca géarmhíochaine neamh-chomhbhrúiteach i gcomparáid le rialuithe sláintiúla29. Tá ról lárnach ag IL-17 in athlasadh, díobháil fíocháin i ngalair uath-imdhíonachta30 agus feabhsaíonn sé an freagairt imdhíonachta ar IFN-γ31. Tuairiscíodh díobháil fíocháin fheabhsaithe idirghabhála IL-17 i lucha MRL/lpr32 agus lucha atá so-ghabhálach d'uath-imdhíonacht33. Is féidir le IL-4 cosc ​​a chur ar léiriú cítocíní pró-athlastacha (amhail IL-1β agus TNFα) agus gníomhachtú macrafagach34. Tuairiscíodh go raibh léiriú mRNA IL-4 difriúil sa ghrúpa NPE i gcomparáid le IL-17 agus IFN-γ ag an bpointe ama céanna; Bhí léiriú mRNA IFN-γ sa ghrúpa NPE i bhfad níos airde ná mar a bhí sna grúpaí eile. Dá bhrí sin, d'fhéadfadh táirgeadh IFN-γ a bheith ina idirghabhálaí den fhreagairt athlastach a spreagtar le hidirshuíomh NP. Léirigh staidéir go dtáirgeann cineálacha éagsúla cealla IFN-γ, lena n-áirítear cealla T cúnta cineál 1 gníomhachtaithe, cealla marfacha nádúrtha, agus macrófagaigh35,36, agus is cíteacín pró-athlastach tábhachtach é a chuireann freagairtí imdhíonachta chun cinn37.
Tugann an staidéar seo le fios go bhféadfadh freagairt uath-imdhíonachta a bheith i gceist le tarlú agus forbairt MC. Fuair ​​Luoma et al. amach go bhfuil tréithe comhartha MC agus NP suntasach cosúil ar MRI, agus léiríonn an dá cheann comhartha ard i seicheamh T2W38. Deimhníodh go bhfuil dlúthbhaint ag roinnt cítocíní le tarlú MC, amhail IL-139. Mhol Ma et al. go bhféadfadh tionchar mór a bheith ag gobadh suas nó síos NP ar tharla agus forbairt MC12. Thuairiscigh Bobechko40 agus Herzbein et al.41 gur fíochán imdhíonfhulangach é NP nach féidir leis dul isteach sa chúrsaíocht soithíoch ó bhreith. Tugann gobadh NP coirp choigríche isteach sa soláthar fola, rud a idirghabhálann imoibrithe uath-imdhíonachta áitiúla42. Is féidir le himoibrithe uath-imdhíonachta líon mór fachtóirí imdhíonachta a spreagadh, agus nuair a bhíonn na fachtóirí seo nochtaithe go leanúnach do fhíocháin, is féidir leo athruithe a chur faoi deara i gcomharthaíocht43. Sa staidéar seo, is fachtóirí imdhíonachta tipiciúla iad ró-léiriú IL-4, IL-17 agus IFN-γ, rud a chruthaíonn tuilleadh an dlúthghaol idir NP agus MCanna44. Déanann an tsamhail ainmhíoch seo aithris mhaith ar bhriseadh tríd an NP agus ar iontráil isteach sa phláta deiridh. Léirigh an próiseas seo tuilleadh tionchar na huath-imdhíonachta ar MC.
Mar a bhíothas ag súil leis, cuireann an tsamhail ainmhíoch seo ardán féideartha ar fáil dúinn chun staidéar a dhéanamh ar MC. Mar sin féin, tá roinnt teorainneacha fós ag baint leis an tsamhail seo: ar dtús, le linn chéim breathnóireachta ainmhithe, ní mór roinnt coiníní idirmheánacha a eotanáis le haghaidh tástála histeolaíoch agus bitheolaíochta móilíní, mar sin "titeann roinnt ainmhithe as úsáid" le himeacht ama. Ar an dara dul síos, cé go bhfuil trí phointe ama socraithe sa staidéar seo, ar an drochuair, níor shamhaltaíomar ach cineál amháin MC (athrú cineál Modic I), mar sin ní leor é chun ionadaíocht a dhéanamh ar phróiseas forbartha galair an duine, agus ní mór níos mó pointí ama a shocrú chun breathnú níos fearr ar na hathruithe comhartha go léir. Ar an tríú dul síos, is féidir na hathruithe i struchtúr fíocháin a thaispeáint go soiléir trí dhaiteadh histeolaíoch, ach is féidir le roinnt teicnící speisialaithe na hathruithe micreastruchtúracha sa tsamhail seo a nochtadh níos fearr. Mar shampla, baineadh úsáid as micreascópacht solais pholairithe chun foirmiú fibrocartilage i ndioscaí idirveirteabracha coiníní a anailísiú45. Éilíonn na héifeachtaí fadtéarmacha a bhaineann le NP ar MC agus ar phláta deiridh.
Roinneadh ceithre choinín bána is caoga fireann ón Nua-Shéalainn (meáchan thart ar 2.5-3 kg, aois 3-3.5 mhí) go randamach ina ngrúpa oibríochta bréige, grúpa ionchlannáin matáin (grúpa ME) agus grúpa ionchlannáin fréimhe néaróg (grúpa NPE). D’fhormheas Coiste Eitice Ospidéal Tianjin na nósanna imeachta turgnamhacha go léir, agus rinneadh na modhanna turgnamhacha i gcomhréir dhlúth leis na treoirlínte ceadaithe.
Rinneadh roinnt feabhsuithe ar theicníc mháinliachta S. Sobajima 46. Cuireadh gach coinín i riocht luí cliathánach agus nochtadh dromchla tosaigh cúig dhiosca idirveirteabracha lumbar (IVDanna) as a chéile ag baint úsáide as cur chuige retroperitoneal posterolateral. Tugadh ainéistéise ginearálta (20% úireatán, 5 ml/kg tríd an bhféith chluas) do gach coinín. Rinneadh gearradh craicinn fadaimseartha ó imeall íochtarach na n-easnacha go dtí imeall an pheilbhis, 2 cm ventral ó na matáin paraveirteabracha. Nochtadh an dromlach deas anterolateral ó L1 go L6 trí dhíscaoileadh géar agus maol an fhíocháin fho-chraicinn atá os a chionn, an fhíocháin retroperitoneal, agus na matáin (Fíor 6A). Cinneadh leibhéal an diosca ag baint úsáide as imeall an pheilbhis mar shéadchomhartha anatamaíoch don leibhéal diosca L5-L6. Bain úsáid as snáthaid pollta 16-thomhas chun poll a dhruileáil in aice le pláta deiridh an veirteabra L5 go doimhneacht 3 mm (Fíor 6B). Bain úsáid as steallaire 5 ml chun an núicléas pulposus uath-logach a shú isteach sa diosca idirveirteabrach L1-L2 (Fíor 6C). Bain an núicléas pulposus nó an matán de réir riachtanais gach grúpa. Tar éis an poll druileála a dhoimhniú, cuirtear fuálacha in-ionsúite ar an fascia dhomhain, an fascia dromchlach agus an craiceann, agus aire á tabhairt gan damáiste a dhéanamh do fhíochán periosteal an choirp veirteabraigh le linn na máinliachta.
(A) Nochttar an diosca L5–L6 trí chur chuige retroperitoneal posterolateral. (B) Úsáid snáthaid 16-thomhas chun poll a dhruileáil in aice le pláta deiridh L5. (C) Bailítear MFanna uathlogacha.
Riaradh ainéistéise ginearálta le 20% úireatán (5 ml/kg) arna riaradh tríd an bhféith chluas, agus rinneadh radaighraif den spine lumbar arís ag 12, 16, agus 20 seachtain tar éis na hoibríochta.
Íobairtíodh coiníní trí instealladh intramuscular de chetamine (25.0 mg/kg) agus pentobarbital sóidiam infhéitheach (1.2 g/kg) a thabhairt dóibh 12, 16 agus 20 seachtain tar éis na máinliachta. Baineadh an spine ar fad le haghaidh anailíse histolaíochta agus rinneadh fíoranailís. Baineadh úsáid as trascríobh droim ar ais cainníochtúil (RT-qPCR) agus Western blotting chun athruithe i bhfachtóirí imdhíonachta a bhrath.
Rinneadh scrúduithe MRI ar choiníní ag baint úsáide as maighnéad cliniciúil 3.0 T (GE Medical Systems, Florence, SC) a raibh glacadóir corna géag ortagónach air. Rinneadh na coiníní a ainéistéisiú le 20% úireatán (5 mL/kg) tríd an bhféith chluas agus ansin cuireadh ar a ndroim iad laistigh den mhaighnéad agus réigiún an lumbar dírithe ar chorna dromchla ciorclach 5 orlach ar trastomhas (GE Medical Systems). Fuarthas íomhánna logánaitheora corónach T2-ualaithe (TR, 1445 ms; TE, 37 ms) chun suíomh an diosca lumbar a shainiú ó L3–L4 go L5–L6. Fuarthas slisní plána sagittal T2-ualaithe leis na socruithe seo a leanas: seicheamh casadh-macalla tapa le ham athrá (TR) de 2200 ms agus am macalla (TE) de 70 ms, maitrís; réimse radhairc de 260 agus ocht spreagadh; Ba é 2 mm an tiús gearrtha, ba é 0.2 mm an bhearna.
Tar éis an grianghraf deireanach a thógáil agus an coinín deireanach a mharú, baineadh na dioscaí bréige, na dioscaí matán-leabaithe, agus na dioscaí NP le haghaidh scrúdú histeolaíoch. Socraíodh na fíocháin i formailin maolaithe neodrach 10% ar feadh seachtaine, dícháilíodh iad le haigéad eitiléindiamínteatraaicéiteach, agus gearradh iad ina n-alt paraifín. Leabaíodh bloic fíocháin i paraifín agus gearradh ina n-altanna sagittal (5 μm ar tiús) ag baint úsáide as micritóm. Daiteadh na haltanna le haemaitocsailín agus eosin (H&E).
Tar éis na dioscaí idirveirteabracha a bhailiú ó na coiníní i ngach grúpa, baineadh RNA iomlán amach ag baint úsáide as colún UNIQ-10 (Shanghai Sangon Biotechnology Co., Ltd., an tSín) de réir threoracha an mhonaróra agus córas trascríobh droim ar ais ImProm II (Promega Inc., Madison, WI, SAM). Rinneadh trascríobh droim ar ais.
Rinneadh RT-qPCR ag baint úsáide as Prism 7300 (Applied Biosystems Inc., SAM) agus SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, SAM) de réir threoracha an mhonaróra. Ba é 20 μl toirt imoibriúcháin an PCR agus bhí 1.5 μl de cDNA caolaithe agus 0.2 μM de gach tosaitheoir ann. Dearadh na tosaitheoirí ag OligoPerfect Designer (Invitrogen, Valencia, CA) agus monaraíodh iad ag Nanjing Golden Stewart Biotechnology Co., Ltd. (an tSín) (Tábla 1). Baineadh úsáid as na coinníollacha timthrialla teirmeacha seo a leanas: céim ghníomhachtaithe polaiméaráise tosaigh ag 94°C ar feadh 2 nóiméad, ansin 40 timthriall de 15 soicind an ceann ag 94°C le haghaidh dínádúrú teimpléid, annealing ar feadh 1 nóiméad ag 60°C, síneadh, agus fluaraiseacht. Rinneadh tomhais ar feadh 1 nóiméad ag 72°C. Aimplíodh na samplaí go léir trí huaire agus úsáideadh an meánluach le haghaidh anailíse RT-qPCR. Rinneadh anailís ar shonraí aimpliúcháin ag baint úsáide as FlexStation 3 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, SAM). Rinneadh normalú ar léiriú géine IL-4, IL-17, agus IFN-γ don rialú endóigineach (ACTB). Ríomhadh leibhéil choibhneasta léirithe mRNA sprice ag baint úsáide as an modh 2-ΔΔCT.
Baineadh próitéin iomlán as fíocháin ag baint úsáide as homaiginitheoir fíocháin i maolán líse RIPA (ina bhfuil cócteil coscaire próitéáis agus fosfatáis) agus ansin rinneadh lártheifneoiriú air ag 13,000 rpm ar feadh 20 nóiméad ag 4°C chun smionagar fíocháin a bhaint. Luchtaíodh caoga micreagram próitéine in aghaidh an lána, scartha le 10% SDS-PAGE, agus ansin aistríodh iad chuig scannán PVDF. Rinneadh blocáil i mbainne tirim neamh-saille 5% i saline Tris-maolaithe (TBS) ina raibh 0.1% Tween 20 ar feadh 1 uair an chloig ag teocht an tseomra. Goradh an scannán le hantashubstaint phríomhúil frith-dhecorin coinín (caolaithe 1:200; Boster, Wuhan, an tSín) (caolaithe 1:200; Bioss, Béising, an tSín) thar oíche ag 4°C agus imoibrigh sé ar an dara lá; le hantashubstaint thánaisteach (imdhíonglobulin G gabhar i gcoinne coinín ag caolú 1:40,000) in éineacht le peroxidase raidis capaill (Boster, Wuhan, an tSín) ar feadh 1 uair an chloig ag teocht an tseomra. Braitheadh ​​comharthaí blot Thiar trí cheimiluminescence méadaithe ar an scannán cheimiluminescence tar éis ionradaíocht X-gha. Chun críocha anailíse dlúismhéadraigh, scanadh agus cainníochtaíodh na blots ag baint úsáide as bogearraí BandScan agus léiríodh na torthaí mar an gcóimheas idir imdhíon-imoibríochtacht an ghéin sprice agus imdhíon-imoibríochtacht tubulin.
Rinneadh ríomhanna staitistiúla ag baint úsáide as an bpacáiste bogearraí SPSS16.0 (SPSS, SAM). Léiríodh na sonraí a bailíodh le linn an staidéir mar mheán ± diall caighdeánach (meán ± SD) agus rinneadh anailís orthu ag baint úsáide as anailís athraitheas aontreo (ANOVA) chun na difríochtaí idir an dá ghrúpa a chinneadh. Meastar gur suntasach ó thaobh staitisticí de a bhí P < 0.05.
Dá bhrí sin, d’fhéadfadh sé go mbeadh bunú samhail ainmhíoch de MC trí NPs uathlogacha a ionchlannú isteach sa chorp veirteabrach agus breathnóireacht mhacra-anatamach, anailís MRI, meastóireacht histolaíoch agus anailís bhitheolaíoch mhóilíneach a dhéanamh ina uirlis thábhachtach chun meicníochtaí MC daonna a mheas agus a thuiscint agus idirghabhálacha teiripeacha nua a fhorbairt.
Conas an t-alt seo a lua: Han, C. et al. Bunaíodh samhail ainmhíoch d'athruithe Modic trí núicléas pulposus uath-logach a ionchlannú i gcnámh fo-chondrach an dromlaigh lumbar. Sci. Rep. 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
Weishaupt, D., Zanetti, M., Hodler, J., agus Boos, N. Íomháú athshondais mhaighnéadaigh an dromlaigh lumbar: leitheadúlacht herniation agus coinneáil diosca, comhbhrú fréimhe néaróg, neamhghnáchaíochtaí pláta deiridh, agus osteoarthritis chomhpháirteach aghaidhe i measc oibrithe deonacha gan siomptóim. ráta. Radiology 209, 661–666, doi:10.1148/radiology.209.3.9844656 (1998).
Kjaer, P., Korsholm, L., Bendix, T., Sorensen, JS, agus Leboeuf-Eed, K. Athruithe Modic agus a ngaol le torthaí cliniciúla. Irisleabhar Dromlaigh na hEorpa: foilseachán oifigiúil de chuid Chumann Dromlaigh na hEorpa, Chumann Eorpach na Mífhoirmíochta Dromlaigh, agus Chumann Eorpach na Taighde ar an Dromlach Ceirbheacsach 15, 1312–1319, doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006).
Kuisma, M., et al. Athruithe modhacha i bplátaí deiridh veirteabracha an lumbar: leitheadúlacht agus baint le pian íochtarach droma agus sciatica in oibrithe fireanna meánaosta. Spine 32, 1116–1122, doi:10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
de Roos, A., Kressel, H., Spritzer, K., agus Dalinka, M. MRI d'athruithe smior cnámh in aice leis an pláta deiridh i ngalar meathlúcháin an dromlaigh lumbar. AJR. American Journal of Radiology 149, 531–534, doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
Modic, MT, Steinberg, PM, Ross, JS, Masaryk, TJ, agus Carter, JR Galar diosca díghiniúnach: meastóireacht ar athruithe smior veirteabracha le MRI. Radiology 166, 193–199, doi:10.1148/radiology.166.1.3336678 (1988).
Modic, MT, Masaryk, TJ, Ross, JS, agus Carter, JR Íomháú galar diosca meathlúcháin. Radiology 168, 177–186, doi: 10.1148/radiology.168.1.3289089 (1988).
Jensen, TS, et al. Léiríonn réamhinsintí pláta deiridh neoveirteabrach (Modic) athruithe sa daonra i gcoitinne. Irisleabhar Dromlaigh na hEorpa: Foilseachán Oifigiúil Chumann Dromlaigh na hEorpa, Chumann Eorpach na Mífhoirmíochta Dromlaigh, agus Chumann Eorpach na Taighde ar an Dromlach Ceirbheacsach, Rannán 19, 129–135, doi: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2010).
Albert, HB agus Mannisch, K. Athruithe Modic tar éis herniation diosca lumbar. Irisleabhar Dromlaigh na hEorpa: Foilseachán Oifigiúil Chumann Dromlaigh na hEorpa, Chumann Eorpach na Mífhoirmíochta Dromlaigh agus Chumann Eorpach na Taighde ar an Dromlach Ceirbheacsach 16, 977–982, doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007).
Kerttula, L., Luoma, K., Vehmas, T., Gronblad, M., agus Kaapa, E. Is féidir le hathruithe cineál I Modic meath diosca dífhoirmithe atá ag dul i méid go mear a thuar: staidéar ionchasach 1 bhliain. European Spine Journal 21, 1135–1142, doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
Hu, ZJ, Zhao, FD, Fang, XQ agus Fan, SW Athruithe Modic: cúiseanna féideartha agus rannchuidiú le meathlú diosca lumbar. Hypotheses Leighis 73, 930–932, doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
Krok, HV Réabadh diosca inmheánach. Fadhbanna prolapse diosca thar 50 bliain. Spine (Phila Pa 1976) 11, 650–653 (1986).


Am an phoist: 13 Nollaig 2024