Go raibh maith agat as cuairt a thabhairt ar Nature.com. Tá tacaíocht theoranta do CSS sa leagan brabhsálaí atá in úsáid agat. Chun na torthaí is fearr a fháil, molaimid duit leagan níos nuaí de do bhrabhsálaí a úsáid (nó Mód Comhoiriúnachta a dhíchumasú in Internet Explorer). Idir an dá linn, chun tacaíocht leanúnach a chinntiú, táimid ag taispeáint an tsuímh gan stíl ná JavaScript.
Is minic a léirítear fás miocróbach i gcréachta mar bhithfhilmeanna, rud a chuireann isteach ar leigheas agus atá deacair a dhíothú. Maítear i gcóirithe airgid nua go gcomhracann siad ionfhabhtuithe créachta, ach is gnách go mbíonn a n-éifeachtúlacht anta-bhithfhilmeanna agus a n-éifeachtaí cneasaithe neamhspleácha ar ionfhabhtú anaithnid. Agus samhlacha bithfhilmeanna in vitro agus in vivo de Staphylococcus aureus agus Pseudomonas aeruginosa á n-úsáid againn, tuairiscímid éifeachtacht cóirithe a ghineann ian Ag1+; cóirithe Ag1+ ina bhfuil aigéad eitiléindiaminetetraaicéiteach agus clóiríd beinséatóiniam (Ag1+/EDTA/BC), agus cóirithe ina bhfuil níotráit airgid (ocsaishaltaí Ag), a tháirgeann iain Ag1+, Ag2+ agus Ag3+ chun dul i ngleic le bithfhilmeanna créachta agus a thionchar ar leigheas. Ní raibh mórán éifeachtaí ag cóirithe Ag1+ ar bhithfhilmeanna créachta in vitro agus i lucha (C57BL/6j). I gcodarsnacht leis sin, laghdaigh salainn Ag ocsaiginithe agus cóirithe Ag1+/EDTA/BC líon na mbaictéar inmharthana i mbithscannáin in vitro go suntasach agus léirigh siad laghdú suntasach ar chomhpháirteanna baictéaracha agus EPS i mbithscannáin chréachta lucha. Bhí éifeachtaí difriúla ag na cóirithe seo ar leigheas créachta atá ionfhabhtaithe le bithscannán agus créachta nach bhfuil ionfhabhtaithe le bithscannán, agus bhí éifeachtaí níos tairbhiúla ag cóirithe salainn ocsaiginithe ar ath-epitéiliú, méid créachta agus athlasadh i gcomparáid le cóireálacha rialaithe agus cóirithe airgid eile. D’fhéadfadh éifeachtaí difriúla a bheith ag airíonna fisiciceimiceacha éagsúla cóirithe airgid ar bhithscannán agus leigheas créachta, agus ba cheart é seo a chur san áireamh agus cóiriú á roghnú le haghaidh cóireáil créachta atá ionfhabhtaithe le bithscannán.
Sainmhínítear créachta ainsealacha mar “créachta nach n-éiríonn leo dul chun cinn trí na céimeanna gnáth cneasaithe ar bhealach ordúil agus tráthúil”1. Cruthaíonn créachta ainsealacha ualach síceolaíoch, sóisialta agus eacnamaíoch d’othair agus don chóras cúram sláinte. Meastar go gcaitear £8.3 billiún in 2017–182 ar chréachta agus comhghalair ghaolmhara a chóireáil. Is fadhb phráinneach iad créachta ainsealacha sna Stáit Aontaithe faoi láthair freisin, agus meastachán á dhéanamh ag Medicare ar chostas bliantúil cóireála othar a bhfuil créachta orthu ag $28.1–$96.8 billiún3.
Is fachtóir mór é ionfhabhtú a chuireann cosc ar leigheas créachta. Is minic a léirítear ionfhabhtuithe mar bhiofhisicíní, atá i láthair i 78% de chréachtaí ainsealacha nach bhfuil ag leigheas. Cruthaítear bithfhisicíní nuair a cheanglaíonn miocrorgánaigh go neamh-inchúlghairthe le dromchlaí, amhail dromchlaí créachta, agus is féidir leo comhiomlánú chun pobail a tháirgeann polaiméir eachtarcheallach (EPS) a fhoirmiú. Tá bithfhisicíní créachta bainteach le freagairt athlastach méadaithe as a dtagann damáiste fíocháin, rud a fhéadann moill a chur ar leigheas nó é a chosc4. D’fhéadfadh an méadú ar dhamáiste fíocháin a bheith mar gheall i bpáirt ar ghníomhaíocht mhéadaithe maitrís-mhiotallópróitéináisí, collaigéináise, elastáise agus speicis ocsaigine imoibríoch5. Thairis sin, is tomhaltóirí arda ocsaigine iad cealla athlastacha agus bithfhisicíní féin agus dá bhrí sin is féidir leo hipocsa fíocháin áitiúil a chur faoi deara, rud a ídíonn cealla den ocsaigin ríthábhachtach atá riachtanach le haghaidh deisiú éifeachtach fíocháin6.
Bíonn bithfhilmeanna aibí an-fhriotaíoch in aghaidh gníomhairí frithmhiocróbacha, agus teastaíonn straitéisí ionsaitheacha chun ionfhabhtuithe bithfhilmeanna a rialú, amhail cóireáil mheicniúil agus cóireáil fhrithmhiocróbach éifeachtach ina diaidh sin. Ós rud é gur féidir le bithfhilmeanna athghiniúint go tapa, is féidir le frithmhiocróbacha éifeachtacha an riosca athfhoirmithe a laghdú tar éis díbhrídithe máinliachta7.
Úsáidtear airgead níos mó agus níos mó i bhfeistis fhrithmhiocróbacha agus is minic a úsáidtear é mar chóireáil chéadlíne le haghaidh créachta ionfhabhtaithe ainsealacha. Tá go leor feistis airgid atá ar fáil go tráchtála, agus comhdhéanamh, tiúchan agus maitrís bonn airgid difriúil i ngach ceann acu. Mar thoradh ar dhul chun cinn i mbandaí láimhe airgid, forbraíodh bandaí láimhe airgid nua. Tá foirm mhiotalach an airgid (Ag0) támh; Chun éifeachtacht fhrithmhiocróbach a bhaint amach, caithfidh sé leictreon a chailleadh chun airgead ianach (Ag1+) a fhoirmiú. Bíonn comhdhúile airgid nó airgead miotalach i bhfeistis airgid traidisiúnta a dhíscaoileann nuair a bhíonn siad nochtaithe do leacht chun iain Ag1+ a fhoirmiú. Imoibríonn na hiain Ag1+ seo leis an gcill bhaictéarach, ag baint leictreoin as comhpháirteanna struchtúracha nó as próisis ríthábhachtacha atá riachtanach le haghaidh marthanais. Mar thoradh ar theicneolaíocht phaitinnithe, forbraíodh comhdhúil airgid nua, ocsaisaltaí Ag (níotráit airgid, Ag7NO11), atá san áireamh i bhfeistis créachta. Murab ionann agus airgead traidisiúnta, táirgeann dianscaoileadh salainn ina bhfuil ocsaigin stáit airgid le valens níos airde (Ag1+, Ag2+ agus Ag3+). Léirigh staidéir in vitro go bhfuil tiúchain ísle salainn airgid ocsaiginithe níos éifeachtaí ná airgead aon-ian (Ag1+) i gcoinne baictéir phataigineacha ar nós Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus agus Escherichia coli8,9. Cuimsíonn cineál nua eile feistis airgid comhábhair bhreise, eadhon aigéad eitiléindiaminetetraacetic (EDTA) agus clóiríd beinséatóiniam (BC), a thuairiscítear a dhíríonn ar EPS bithfhilm agus dá bhrí sin a mhéadaíonn treá airgid isteach sa bhithfhilm. Cuireann na teicneolaíochtaí nua airgid seo bealaí nua ar fáil chun díriú ar bhithfhilmeanna créachta. Mar sin féin, tá tionchar na n-ábhar frithmhiocróbach seo ar thimpeallacht na créachta agus ar leigheas neamhspleách ar ionfhabhtú tábhachtach chun a chinntiú nach gcruthaíonn siad timpeallacht chréachta neamhfhabhrach ná nach gcuireann siad moill ar leigheas. Tuairiscíodh imní faoi chíteatocsaineacht airgid in vitro le roinnt feistis airgid10,11. Mar sin féin, níl cíteatocsaineacht in vitro aistrithe go tocsaineacht in vivo fós, agus tá próifíl sábháilteachta mhaith léirithe ag roinnt feistis Ag1+12.
Anseo, rinneamar imscrúdú ar éifeachtacht feistis charbocsaimeitilcheallalóis ina bhfuil foirmlithe airgid nua i gcoinne bithfhilm chréachta in vitro agus in vivo. Ina theannta sin, rinneadh measúnú ar éifeachtaí na bhfeistis seo ar fhreagairtí imdhíonachta agus ar leigheas neamhspleách ar ionfhabhtú.
Bhí na feistis uile a úsáideadh ar fáil go tráchtála. Is feistis snáithín glóthaí neamh-fhrithmhiocróbach 100% carbocsaimeitileiceiléalóis (CMC) é Feistis Snáithín Glóthaí 3M Kerracel (3M, Knutsford, an Ríocht Aontaithe) a úsáideadh mar an feistis rialaithe sa staidéar seo. Rinneadh meastóireacht ar thrí fheistiú airgid CMC frithmhiocróbach, eadhon feistis Ag 3M Kerracel (3M, Knutsford, an Ríocht Aontaithe), ina bhfuil 1.7% de réir meáchain, salann airgid ocsaiginithe (Ag7NO11) in iain airgid níos airde valens (Ag1+, Ag2+ agus Ag3+). Le linn dianscaoileadh Ag7NO11, cruthaítear iain Ag1+, Ag2+ agus Ag3+ i gcóimheas 1:2:4. Feistis Aquacel Ag Extra ina bhfuil 1.2% clóiríd airgid (Ag1+) (ConvaTec, Deeside, an Ríocht Aontaithe) 13 agus feistis Aquacel Ag + Extra ina bhfuil 1.2% clóiríd airgid (Ag1+), EDTA agus clóiríd beinseatóiniam (ConvaTec, Deeside, an Ríocht Aontaithe) 14.
Ba iad na cineálacha a úsáideadh sa staidéar seo ná Pseudomonas aeruginosa NCTC 10781 (Public Health England, Salisbury) agus Staphylococcus aureus NCTC 6571 (Public Health England, Salisbury).
Fásadh baictéir thar oíche i mbraith Muller-Hinton (Oxoid, Altrincham, an Ríocht Aontaithe). Ansin caolaíodh an cultúr thar oíche 1:100 i mbraith Mueller-Hinton agus plátáladh 200 µl ar scannáin steiriúla Whatman ciclipóir 0.2 µm (Whatman plc, Maidstone, an Ríocht Aontaithe) ar phlátaí agair Mueller-Hinton (Sigma-Aldrich Company Ltd, Kent, an Bhreatain Mhór). Foirmiú bithfhilm choilíneach ag 37°C ar feadh 24 uair an chloig. Rinneadh tástáil ar na bithfhilmeanna coilíneacha seo le haghaidh crapadh logartamach.
Gearr an feistis ina phíosaí cearnacha 3 cm2 agus réamh-thaisleáigh iad le huisce dí-ianaithe steiriúil. Cuir an bindealán thar bhithfhilm an choilíneachta ar an pláta agair. Baineadh gach 24 heicteár den bhithfhilm, agus rinneadh baictéir inmharthana laistigh den bhithfhilm (CFU/ml) a chainníochtú trí chaolú sraitheach (10−1 go 10−7) i mbraith neodraithe Uillinn Lae (Merck-Millipore). Tar éis 24 uair an chloig goradáin ag 37°C, rinneadh comhaireamh plátaí caighdeánach ar phlátaí agair Mueller-Hinton. Rinneadh gach cóireáil agus pointe ama faoi thrí, agus rinneadh comhaireamh plátaí arís do gach caolú.
Faightear craiceann bolg muice ó mhuca baineanna Móra Bána laistigh de 15 nóiméad ón marú i gcomhréir le caighdeáin onnmhairithe an Aontais Eorpaigh. Bearradh an craiceann agus glanadh é le wipes alcóil, agus ansin reoitear é ag -80°C ar feadh 24 uair an chloig chun an craiceann a dhíbheochtú. Tar éis leá, nitear píosaí craicinn 1 cm2 trí huaire le PBS, 0.6% hipeaclóirít sóidiam, agus 70% eatánól ar feadh 20 nóiméad gach uair. Sula mbaintear an eipideirm, bain aon eatánól atá fágtha trí níochán 3 huaire i PBS steiriúil. Saothraíodh an craiceann i pláta 6-tholl le scannán níolóin 0.45-μm tiubh (Merck-Millipore) ar a bharr agus 3 ceap ionsúiteach (Merck-Millipore) ina raibh 3 ml séiream féatais bólachta (Sigma) curtha leis le 10% Meán modhnaithe Dulbecco (Dulbecco's Modified Eagle Medium – Aldrich Ltd.).
Fásadh bithfhilmeanna coilíneacha mar a thuairiscítear le haghaidh staidéir nochta bithfhilmeanna. Tar éis an bithfhilm a shaothrú ar an membrane ar feadh 72 uair an chloig, cuireadh an bithfhilm i bhfeidhm ar dhromchla an chraicinn ag baint úsáide as lúb ionaclú steiriúil agus baineadh an membrane. Ansin goradh an bithfhilm ar dheirm na muice ar feadh 24 uair an chloig breise ag 37°C chun ligean don bhithfhilm aibiú agus cloí le craiceann na muice. Tar éis don bhithfhilm aibiú agus a cheangal, cuireadh feistis 1.5 cm2, réamh-thaisithe le huisce driogtha steiriúil, go díreach ar dhromchla an chraicinn agus goradh é ag 37°C ar feadh 24 uair an chloig. Rinneadh baictéir inmharthana a shamhlú trí dhaiteadh trí imoibrí inmharthanachta cealla PrestoBlue (Invitrogen, Life Technologies, Paisley, an Ríocht Aontaithe) a chur i bhfeidhm go haonfhoirmeach ar dhromchla apical gach easphlandaithe agus é a ghoradh ar feadh 5 nóiméad. Bain úsáid as an gceamara digiteach Leica DFC425 chun íomhánna a ghabháil láithreach ar an micreascóp Leica MZ8. Rinneadh cainníochtú ar na limistéir a bhí daite bándearg ag baint úsáide as bogearraí Image Pro leagan 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (mediacy.com)). Rinneadh micreascópacht leictreon scanála mar a thuairiscítear thíos.
Caolaíodh baictéir a fhásadh thar oíche 1:100 i mbrú Mueller-Hinton. Cuireadh 200 μl den chultúr le scannán cichlipóire steiriúil 0.2 μm Whatman (Whatman, Maidstone, an Ríocht Aontaithe) agus cuireadh ar agar Mueller-Hinton é. Goradh plátaí bithfhilm ag 37°C ar feadh 72 uair an chloig chun ligean do fhoirmiú bithfhilm aibí.
Tar éis 3 lá d’aibiú an bhithfhilm, cuireadh bindealán cearnach 3 cm2 go díreach ar an bhithfhilm agus goradh é ag 37°C ar feadh 24 uair an chloig. Tar éis an bindealán a bhaint de dhromchla an bhithfhilm, cuireadh 1 ml d’Imoibrí Inmharthanachta Cealla PrestoBlue (Invitrogen, Waltham, MA) le dromchla gach bhithfhilm ar feadh 20 soicind. Triomaíodh na dromchlaí sular taifeadadh athruithe datha ag baint úsáide as ceamara digiteach Nikon D2300 (Nikon UK Ltd., Kingston, an Ríocht Aontaithe).
Ullmhaigh cultúir thar oíche ar agar Mueller-Hinton, aistrigh coilíneachtaí aonair go 10 ml de bhrat Mueller-Hinton agus goradh ar chroitheadóir ag 37°C (100 rpm). Tar éis goradh thar oíche, caolaíodh an cultúr 1:100 i mbrat Mueller-Hinton agus cuireadh 300 µl ar scannán cichlipóire Whatman ciorclach 0.2 µm (Whatman International, Maidstone, an Ríocht Aontaithe) ar agar Mueller-Hinton agus goradh é ag 37°C laistigh de 72 uair an chloig. . Cuireadh an bithscannán aibí i bhfeidhm ar an chréacht mar a thuairiscítear thíos.
Rinneadh an obair ar fad le hainmhithe in Ollscoil Mhanchain faoi cheadúnas tionscadail arna cheadú ag an Oifig um Leas Ainmhithe agus Athbhreithniú Eiticiúil (P8721BD27) agus i gcomhréir leis na treoirlínte a d’fhoilsigh an Oifig Baile faoin ASPA athbhreithnithe 2012. Chloígh na húdair ar fad leis na treoirlínte teachta. Baineadh úsáid as lucha C57BL/6j ocht seachtaine d’aois (Envigo, Oxon, an Ríocht Aontaithe) do na staidéir in vivo ar fad. Rinneadh ainéistéisiú ar lucha le isoflurane (Piramal Critical Care Ltd, West Drayton, an Ríocht Aontaithe) agus bearradh agus glanadh a ndromchlaí droma. Tugadh créacht eisceachta 2 × 6 mm do gach luch ansin ag baint úsáide as punch bithóipse Stiefel (Schuco International, Hertfordshire, an Ríocht Aontaithe). I gcás créachta atá ionfhabhtaithe le bithfhilm, cuir bithfhilm choilíneach 72 uair an chloig a fhásann ar an membrane mar a thuairiscítear thuas i bhfeidhm ar an gciseal deirmeach den chréacht ag baint úsáide as lúb ionaclú steiriúil díreach tar éis díobhála agus caith an membrane ar shiúl. Déantar ceintiméadar cearnach amháin de chóiriú a réamh-thaisliú le huisce steiriúil chun timpeallacht chréachta tais a choinneáil. Cuireadh feistis go díreach ar gach créacht agus clúdaíodh iad le scannán 3M Tegaderm (3M, Bracknell, an Ríocht Aontaithe) agus cuireadh greamachán leachtach Mastisol (Eloquest Healthcare, Ferndale, MI) timpeall na n-imeall chun greamaitheacht bhreise a sholáthar. Tugadh Buprenorphine (Animalcare, Eabhrac, an Ríocht Aontaithe) ag tiúchan 0.1 mg/kg mar faoiseamh pian. Maraíodh lucha trí lá tar éis an ghortaithe ag baint úsáide as modh Sceideal 1 agus bain an limistéar créachta, gearr ina dhá leath iad, agus stóráil iad de réir mar is gá.
Rinneadh ruaimniú le haemaitocsailín (ThermoFisher Scientific) agus eosin (ThermoFisher Scientific) de réir phrótacal an mhonaróra. Rinneadh achar na créachta agus an t-ath-epitéiliú a chainníochtú ag baint úsáide as bogearraí Image Pro leagan 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD).
Baineadh céir de chodanna fíocháin i xiléin (ThermoFisher Scientific, Loughborough, an Ríocht Aontaithe), athhiodráitíodh iad le 100–50% eatánól grádaithe, agus tumadh iad ar feadh tamaill ghearr in uisce dí-ianaithe (ThermoFisher Scientific). Rinneadh imdhíoneolaíocht-cheimic ag baint úsáide as an trealamh VectaStain Elite ABC PK-6104 (Vector Laboratories, Burlingame, CA) de réir phrótacal an mhonaróra. Caolaíodh príomhantasubstaintí i gcoinne neodróifilí NIMP-R14 (Thermofisher Scientific) agus macrófagaigh Ms CD107b Pure M3/84 (BD Biosciences, Wokingham, an Ríocht Aontaithe) 1:100 i dtuaslagán blocála agus cuireadh iad leis an dromchla gearrtha, agus ina dhiaidh sin cuireadh 2 antashubstaint Frith-, VectaStain ABC agus trealamh foshraithe Vector Nova Red Peroxidase (HRP) (Vector Laboratories, Burlingame, CA) agus frithdhaiteadh iad le haemaitocsailín. Fuarthas íomhánna ag baint úsáide as micreascóp Olympus BX43 agus ceamara digiteach Olympus DP73 (Olympus, Southend-on-Sea, an Ríocht Aontaithe).
Socraíodh samplaí craicinn i 2.5% glutaraldehyde agus 4% formaildéad i 0.1 M HEPES (pH 7.4) ar feadh 24 uair an chloig ag 4°C. Díhiodráitíodh na samplaí ag baint úsáide as eatánól grádaithe agus triomaíodh iad i CO2 ag baint úsáide as triomadóir pointe criticiúil Quorum K850 (Quorum Technologies Ltd, Loughton, an Ríocht Aontaithe) agus rinneadh iad a spútarú le cóimhiotal óir-pallaidiam ag baint úsáide as córas spútaróra/urscaoilte lonrúil beag Quorum SC7620. Íomháíodh na samplaí ag baint úsáide as micreascóp leictreon scanála FEI Quanta 250 (ThermoFisher Scientific) chun pointe lárnach na créachta a shamhlú.
Cuireadh iaidíd Toto-1 (2 μM) i bhfeidhm ar dhromchla créachta na luiche a baineadh agus goradh é ar feadh 5 nóiméad ag 37 °C (ThermoFisher Scientific) agus rinneadh é a chóireáil le Syto-60 (10 μM) ag 37 °C (ThermoFisher Scientific). Cruthaíodh íomhánna Z-stack 15 nóiméad ag baint úsáide as Leica TCS SP8.
Rinneadh sonraí macasamhla bitheolaíocha agus teicniúla a thaibliú agus a anailísiú ag baint úsáide as bogearraí Graphpad Prism V9 (GraphPad Software, La Jolla, CA). Baineadh úsáid as anailís aontreo ar athraitheas le comparáidí iolracha ag baint úsáide as tástáil iar-hoc Dunnett chun difríochtaí idir gach cóireáil agus an feistis rialaithe neamh-fhrithmhiocróbach a thástáil. Measadh go raibh luach p <0.05 suntasach.
Rinneadh measúnú ar éifeachtacht na bhfeistis shnáithíneacha glóthacha airgid ar dtús i gcoinne coilíneachtaí bithfhilmeacha Staphylococcus aureus agus Pseudomonas aeruginosa in vitro. Tá foirmlí éagsúla airgid i bhfeistis airgid: táirgeann feistis airgid traidisiúnta iain Ag1+; is féidir le feistis airgid, ar féidir leo iain Ag1+ a tháirgeadh tar éis EDTA/BC a chur leo, maitrís an bhithfhilm a scrios agus baictéir a nochtadh d’airgead faoi éifeacht fhrithmhiocróbach ian airgid.15 agus feistis ina bhfuil salainn Ag ocsaiginithe a tháirgeann iain Ag1+, Ag2+ agus Ag3+. Rinneadh comparáid idir a éifeachtacht agus feistis rialaithe neamh-fhrithmhiocróbach déanta as snáithíní glóthacha. Rinneadh measúnú ar na baictéir inmharthana a bhí fágtha laistigh den bhithfhilm gach 24 uair an chloig ar feadh 8 lá (Fíor 1). Ar lá 5, ath-ionclúdaíodh an bhithfhilm le 3.85 × 105S. Staphylococcus aureus nó 1.22 × 105P. aeruginosa chun téarnamh an bhithfhilm a mheas. I gcomparáid le cóirithe rialaithe neamh-frithmhiocróbacha, ní raibh mórán tionchair ag cóirithe Ag1+ ar inmharthanacht baictéarach i mbithfhilmeanna Staphylococcus aureus agus Pseudomonas aeruginosa thar 5 lá. I gcodarsnacht leis sin, bhí cóirithe ina raibh salainn ocsaiginithe Ag agus Ag1+ + EDTA/BC éifeachtach maidir le baictéir a mharú laistigh den bhithfhilm laistigh de 5 lá. Tar éis ionaclú arís agus arís eile le baictéir phlanctónacha ar lá 5, níor breathnaíodh aon athchóiriú ar an bhithfhilm (Fíor 1).
Cainníochtú baictéar inmharthana i mbithscannáin Staphylococcus aureus agus Pseudomonas aeruginosa tar éis cóireála le feistis airgid. Rinneadh coilíneachtaí bithscannáin Staphylococcus aureus agus Pseudomonas aeruginosa a chóireáil le feistis airgid nó le feistis rialaithe neamh-frithmhiocróbacha, agus cinneadh líon na mbaictéar inmharthana a bhí fágtha gach 24 uair an chloig. Tar éis 5 lá, ath-ionclúdaíodh an bithscannán le 3.85 × 105S. Staphylococcus aureus nó 1.22 × 105P. Foirmíodh coilíneachtaí den bhaictéarplanctóin Pseudomonas aeruginosa ina n-aonar chun téarnamh bithscannáin a mheas. Taispeánann graif an meán +/- earráid chaighdeánach.
Chun tionchar na gcóirithe airgid ar inmharthanacht bithfhilm a shamhlú, cuireadh cóirithe i bhfeidhm ar bhithfhilmeanna aibí a fhásadh ar chraiceann muice ex vivo. Tar éis 24 uair an chloig, baintear an cóiriú agus déantar an bithfhilm a dhaite le ruaim imoibríoch gorm, a mheitibiliú ag baictéir bheo go dath bándearg. Bhí na bithfhilmeanna a ndearnadh cóireáil orthu le cóirithe rialaithe bándearg, rud a léiríonn go raibh baictéir inmharthana laistigh den bhithfhilm (Fíor 2A). I gcodarsnacht leis sin, bhí an bhithfhilm a ndearnadh cóireáil orthu leis an gcóiriú Ag ocsaisól gorm den chuid is mó, rud a léiríonn gur baictéir neamh-inmharthana a bhí fágtha ar dhromchla chraiceann na muice (Fíor 2B). Breathnaíodh dathú measctha gorm agus bándearg i mbithfhilmeanna a ndearnadh cóireáil orthu le cóirithe ina raibh Ag1+, rud a léiríonn go raibh baictéir inmharthana agus neamh-inmharthana laistigh den bhithfhilm (Fíor 2C), ach bhí cóirithe EDTA/BC ina raibh Ag1+ gorm den chuid is mó le roinnt spotaí bándearga, rud a léiríonn limistéir nach raibh tionchar ag an gcóiriú airgid orthu (Fíor 2D). Léirigh cainníochtú na limistéar gníomhach (bándearg) agus neamhghníomhach (gorm) go raibh an paiste rialaithe 75% gníomhach (Fíor 2E). D’fheidhmigh feistis Ag1+ + EDTA/BC ar bhealach cosúil le feistis salann Ag ocsaiginithe, le rátaí marthanais de 13% agus 14%, faoi seach. Laghdaigh an feistis Ag1+ inmharthanacht baictéarach faoi 21% freisin. Breathnaíodh na bithfhilmeanna seo ansin ag baint úsáide as micreascópacht leictreon scanála (SEM). Tar éis cóireála leis an bhfeistis rialaithe agus an feistis Ag1+, breathnaíodh sraith de Pseudomonas aeruginosa ag clúdach craiceann na muice (Fíor 2F,H), ach tar éis cóireála leis an bhfeistis Ag1+, fuarthas cúpla cealla baictéarach agus fuarthas cúpla cealla baictéarach faoi. Is féidir snáithíní collaigine a mheas mar struchtúr fíocháin chraiceann na muice (Fíor 2G). Tar éis cóireála le feistis Ag1+ + EDTA/BC, bhí plaiceanna baictéaracha agus plaiceanna snáithíní collaigine faoina bhun le feiceáil (Fíor 2I).
Amharcléiriú ar bhithscannán Pseudomonas aeruginosa tar éis cóireála le feistis airgid. (A–D) Rinneadh inmharthanacht baictéarach i mbithscannáin Pseudomonas aeruginosa a fhástar ar chraiceann muice a amharcléiriú ag baint úsáide as ruaim inmharthanachta PrestoBlue 24 uair an chloig tar éis cóireála le feistis airgid nó feistis rialaithe neamh-frithmhiocróbach. Bíonn baictéir bheo bándearg, bíonn baictéir neamh-inmharthana agus craiceann muice gorm. (E) Cainníochtú ar bhithscannáin Pseudomonas aeruginosa a fhástar ar chraiceann muice (spota bándearg) ag baint úsáide as micreascópacht leictreon scanála Image Pro leagan 10 (FI) agus a ndearnadh cóireáil orthu le feistis airgid nó le feistis rialaithe neamh-frithmhiocróbach ar feadh 24 uair an chloig. Barra scála SEM = 5 µm. (J–M) D'fhás bithscannáin choilíneacha ar scagairí agus rinneadh iad a dhaite le ruaim imoibríoch PrestoBlue tar éis 24 uair an chloig de ghoir le feistis airgid.
Chun a fháil amach an raibh tionchar ag dlúth-theagmháil idir na feistis agus na bithscannáin ar éifeachtacht na bhfeistis, rinneadh bithscannáin choilíneacha a cuireadh ar dhromchla cothrom a chóireáil leis na feistis ar feadh 24 uair an chloig agus ansin rinneadh iad a dhaite le ruaimeanna imoibríocha. Bhí dath bándearg dorcha ar an mbithscannán neamhchóireáilte (Fíor 2J). I gcodarsnacht le bithscannáin a ndearnadh cóireáil orthu le feistis ina raibh salainn Ag ocsaiginithe (Fíor 2K), léirigh bithscannáin a ndearnadh cóireáil orthu le feistis ina raibh Ag1+ nó Ag1+ + EDTA/BC bandaí de dhaite bándearg (Fíor 2L,M). Léiríonn an dathú bándearg seo láithreacht baictéir inmharthana agus tá sé bainteach leis an limistéar fuála laistigh den fheistis. Cruthaíonn na limistéir fuaite seo spásanna marbha a ligeann do bhaictéir laistigh den bhithscannán maireachtáil.
Chun éifeachtacht na bhfeistis airgid in vivo a mheas, rinneadh créachta lán-thiubha lucha a bhí ionfhabhtaithe le bithfhilmeanna aibí S. aureus agus P. aeruginosa a chóireáil le feistis rialaithe neamh-fhrithmhiocróbacha nó le feistis airgid. Tar éis 3 lá de chóireáil, léirigh anailís íomhá macrascópach méideanna créachta níos lú nuair a rinneadh cóireáil orthu le feistis salainn ocsaiginithe i gcomparáid le feistis rialaithe neamh-fhrithmhiocróbacha agus feistis airgid eile (Fíor 3A-H). Chun na breathnuithe seo a dheimhniú, bailíodh créachta agus rinneadh achar na créachta agus ath-epitéiliú a chainníochtú ar chodanna fíocháin dhaite le haemaitocsailin agus eosin ag baint úsáide as bogearraí image pro leagan 10 (Fíor 3I-L).
Éifeacht na bhfeistis airgid ar dhromchla na créachta agus ath-eipitealú créachta atá ionfhabhtaithe le bithscannáin. (A–H) Cealla beaga atá ionfhabhtaithe le bithscannáin Pseudomonas aeruginosa (A–D) agus Staphylococcus aureus (E–H) tar éis trí lá cóireála le feistis rialaithe neamh-fhrithmhiocróbach, feistis salann Ag ocsaiginithe, feistis Ag1+, agus feistis Ag1+. Íomhánna macrascópacha ionadaíocha. Créachta lucha le feistis Ag1+ + EDTA/BC. (IL) Ionfhabhtú ionadaíoch Pseudomonas aeruginosa, rannóga histeolaíocha daite le haemaitocsailín agus eosin, a úsáidtear chun achar na créachta agus athghiniúint eipitéiliach a chainníochtú. Cainníochtú achar na créachta (M, O) agus céatadán ath-eipitealú (N, P) créachta atá ionfhabhtaithe le bithscannáin Pseudomonas aeruginosa (M, N) agus Staphylococcus aureus (O, P) (in aghaidh an ghrúpa cóireála n = 12). Taispeánann graif meán +/- earráid chaighdeánach. * ciallaíonn p = < 0.05 ** ciallaíonn p = < 0.01; Scála macrascópach = 2.5 mm, scála histolaíoch = 500 µm.
Léirigh cainníochtú achar créachta i gcréachta a raibh bithscannán Pseudomonas aeruginosa orthu (Fíor 3M) go raibh meánmhéid créachta de 2.5 mm2 ag créachta a ndearnadh cóireáil orthu le hocsaishalainn Ag, agus meánmhéid créachta de 3.1 mm2 ag an bhfeistis rialaithe neamh-fhrithmhiocróbach, rud nach bhfuil fíor. Shroich ≥ 0.423 suntasacht staitistiúil (Fíor 3M). Níor léirigh créachta a ndearnadh cóireáil orthu le Ag1+ nó Ag1+ + EDTA/BC aon laghdú ar achar créachta (3.1 mm2 agus 3.6 mm2, faoi seach). Chuir cóireáil le feistis salann Ag ocsaiginithe ath-eipitealú chun cinn níos mó ná an feistis rialaithe neamh-fhrithmhiocróbach (34% agus 15%, faoi seach; p = 0.029) agus Ag1+ nó Ag1+ + EDTA/BC (10% agus 11%) (Fíor 3N). . , faoi seach).
Breathnaíodh treochtaí comhchosúla i limistéar na créachta agus in athghiniúint eipitéiliach i gcréachta a raibh bithscannáin S. aureus orthu (Fíor 3O). Laghdaigh feistis ina raibh salainn airgid ocsaiginithe limistéar na créachta (2.0 mm2) faoi 23% i gcomparáid leis an bhfeistis rialaithe neamh-fhrithmhiocróbach (2.6 mm2), cé nach raibh an laghdú seo suntasach (p = 0.304) (Fíor 3O). Ina theannta sin, laghdaíodh limistéar na créachta sa ghrúpa cóireála Ag1+ beagán (2.4 mm2), agus níor laghdaigh an chréacht a ndearnadh cóireáil uirthi le feistis Ag1+ + EDTA/BC limistéar na créachta (2.9 mm2). Chuir salainn ocsaigine Ag ath-eipitealú créachta a raibh bithscannán S. aureus orthu (31%) chun cinn níos mó ná iad siúd a ndearnadh cóireáil orthu le feistis rialaithe neamh-fhrithmhiocróbach (12%, p = 0.003) (Fíor 3P). Léirigh feistis Ag1+ (16%, p = 0.903) agus feistis Ag+1 + EDTA/BC (14%, p = 0.965) leibhéil athghiniúna eipitéiliach cosúil leis an rialú.
Chun tionchar na bhfeistis airgid ar mhaitrís an bhithfhilm a shamhlú, rinneadh ruaimniú iaidíde Toto 1 agus Syto 60 (Fíor 4). Is ruaim neamh-thréscaoilteach cille é iaidíd Toto 1 ar féidir é a úsáid chun aigéid núicléacha eachtarcheallacha a shamhlú go cruinn, atá flúirseach in EPS na mbithfhilm. Is ruaim tréscaoilteach cille é Syto 60 a úsáidtear mar fhrith-dhaite16. Léirigh breathnuithe ar iaidíd Toto 1 agus Syto 60 i gcréachta ar tugadh bithfhilmeanna Pseudomonas aeruginosa (Fíor 4A-D) agus Staphylococcus aureus (Fíor 4I-L) dóibh, tar éis 3 lá de chóireáil feistis, go raibh EPS sa bhithfhilm laghdaithe go suntasach. ina raibh salainn ocsaiginithe Ag agus Ag1+ + EDTA/BC. Laghdaigh feistis Ag1+ gan comhpháirteanna breise antaibheathachfhilm DNA saor ó chealla go suntasach i gcréachta ar tugadh Pseudomonas aeruginosa dóibh ach ní raibh siad chomh héifeachtach céanna i gcréachta ar tugadh Staphylococcus aureus dóibh.
Íomháú in vivo de bhithscannán créachta tar éis 3 lá de chóireáil le cóirithe rialaithe nó airgid. Íomhánna comhfhócasacha de Pseudomonas aeruginosa (A–D) agus Staphylococcus aureus (I–L) daite le Toto 1 (glas) chun aigéid núicléasacha eachtarcheallacha, comhpháirt de pholaiméirí bithscannán eachtarcheallacha, a léirshamhlú. Chun aigéid núicléasacha intracheallacha a dhaite, bain úsáid as Syto 60 (dearg). aigéid. P. Micreascópacht leictreon scanadh créachta atá ionfhabhtaithe le bithscannáin Pseudomonas aeruginosa (E–H) agus Staphylococcus aureus (M–P) tar éis 3 lá de chóireáil le cóirithe rialaithe agus airgid. Barra scála SEM = 5 µm. Barra scála íomháithe comhfhócasach = 50 µm.
Léirigh micreascópacht leictreon scanála go raibh i bhfad níos lú baictéar i gcréachta lucha ar tugadh coilíneachtaí bithfhilmeacha de Pseudomonas aeruginosa (Fíor 4E-H) agus Staphylococcus aureus (Fíor 4M-P) dóibh tar éis 3 lá de chóireáil le feistis airgid amháin.
Chun meastóireacht a dhéanamh ar éifeacht na gcóirithe airgid ar athlasadh créachta i lucha atá ionfhabhtaithe le bithscannán, rinneadh daite imdhíoneolaíoch ar chodanna de chréachtaí atá ionfhabhtaithe le bithscannán a ndearnadh cóireáil orthu le cóirithe rialaithe nó airgid ar feadh 3 lá ag baint úsáide as antasubstaintí atá sainiúil do neodraifilí agus macrófagaigh. Cinneadh cainníochtúil ar neodraifilí agus macrófagaigh go hinmheánach. fíochán gráinnithe. Fíor 5). Laghdaigh na cóirithe airgid go léir líon na neodraifilí agus na macrófagaigh i gcréachtaí atá ionfhabhtaithe le Pseudomonas aeruginosa i gcomparáid le cóirithe rialaithe neamh-fhrithmhiocróbacha tar éis trí lá cóireála. Mar sin féin, mar thoradh ar chóireáil leis an gcóireáil salann airgid ocsaiginithe, laghdaíodh líon na neodraifilí (p = <0.0001) agus na macrófagaigh (p = <0.0001) i gcomparáid le cóirithe airgid eile a tástáladh (Fíor 5I,J). Cé gur bhain éifeacht níos mó amach ag Ag1+ + EDTA/BC ar bhithscannán créachta, laghdaigh sé leibhéil neodraifilí agus macrófagaigh níos lú ná an cóiriú Ag1+. Breathnaíodh créachta measartha a raibh biofilm S. aureus orthu freisin tar éis iad a chóiriú le hocsaisóil Ag (p = <0.0001), Ag1+ (p = 0.0008) agus Ag1++ EDTA/BC (p = 0.0043) i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe. Breathnaítear treochtaí comhchosúla maidir le neodrapéinia. bindealán (Fíor 5K). Mar sin féin, níor léirigh ach an feistis salann Ag ocsaiginithe laghdú suntasach ar líon na macrófag i bhfíochán gráinnithe i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe i gcréachta a raibh biofilmí S. aureus orthu (p = 0.0339) (Fíor 5L).
Rinneadh cainníochtú ar neodraifilí agus macrófagaigh i gcréachta atá ionfhabhtaithe le bithfhilmeanna Pseudomonas aeruginosa agus Staphylococcus aureus tar éis 3 lá de chóireáil le feistis rialaithe neamh-frithmhiocróbach nó airgid. Rinneadh cainníochtú ar neodraifilí (AD) agus macrófagaigh (EH) i rannóga fíocháin a dhaitear le hantashubstaintí sonracha do neodraifilí nó macrófagaigh. Cainníochtú neodraifilí (I agus K) agus macrófagaigh (J agus L) i gcréachta atá ionfhabhtaithe le bithfhilmeanna Pseudomonas aeruginosa (I agus J) agus Staphylococcus aureus (K & L). N = 12 in aghaidh an ghrúpa. Taispeánann na graif meán +/- earráid chaighdeánach, luachanna suntasachta i gcomparáid le feistis rialaithe neamh-frithmhiocróbach, * ciallaíonn p = < 0.05, ** ciallaíonn p = < 0.01; *** ciallaíonn p = < 0.001; léiríonn p = <0.0001).
Ansin rinneamar measúnú ar éifeacht na bhfeistis airgid ar leigheas neamhspleách ar ionfhabhtú. Rinneadh cóireáil ar chréachtaí eisceachta neamh-ionfhabhtaithe le feistis rialaithe neamh-fhrithmhiocróbach nó le feistis airgid ar feadh 3 lá (Fíor 6). I measc na bhfeistis airgid a tástáladh, níor chosúil ach le créachtaí a ndearnadh cóireáil orthu leis an bhfeistis salainn ocsaiginithe níos lú ar íomhánna macrascópacha ná créachtaí a ndearnadh cóireáil orthu leis an ngrúpa rialaithe (Fíor 6A-D). Léirigh cainníochtú achar na créachta ag baint úsáide as anailís histolaíoch gurbh é 2.35 mm2 meánachar na créachta tar éis cóireála leis an bhfeistis ocsaisóil Ag i gcomparáid le 2.96 mm2 do chréachtaí a ndearnadh cóireáil orthu leis an ngrúpa rialaithe, ach níor shroich an difríocht seo tábhacht staitistiúil (p = 0.488) (Fíor 6I). I gcodarsnacht leis sin, níor breathnaíodh aon laghdú ar achar na créachta tar éis cóireála le feistis Ag1+ (3.38 mm2, p = 0.757) nó Ag1+ + EDTA/BC (4.18 mm2, p = 0.054) i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe. Breathnaíodh méadú ar athghiniúint eipitéiliach leis an bhfeistis Ag ocsaisol i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe (30% vs. 22%, faoi seach), cé nár shroich sé seo suntasacht (p = 0.067), tá sé seo sách suntasach agus dearbhaíonn sé torthaí roimhe seo. Cuireann feistis le hocsaisóil ath-eipitealú chun cinn. -Eipitealú créachta neamhionfhabhtaithe17. I gcodarsnacht leis sin, ní raibh aon éifeacht ag cóireáil le feistis Ag1+ nó Ag1+ + EDTA/BC nó léirigh sé laghdú ar ath-eipitealú i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe.
Éifeacht feistis créachta airgid ar leigheas créachta i lucha neamhionfhabhtaithe le resection iomlán. (AD) Íomhánna macrascópacha ionadaíocha de chréachtaí tar éis trí lá de chóireáil le feistis rialaithe neamh-frithmhiocróbach agus feistis airgid. (EH) Codanna ionadaíocha créachta daite le haemaitocsailín agus eosin. Ríomhadh cainníochtú achar créachta (I) agus céatadán ath-epitelialaithe (J) ó chodanna histolaíochta ag lárphointe na créachta ag baint úsáide as bogearraí anailíse íomhá (n = 11–12 in aghaidh an ghrúpa cóireála). Taispeánann graif meán +/- earráid chaighdeánach. * ciallaíonn p = <0.05.
Tá stair fhada úsáide ag airgead mar theiripe fhrithmhiocróbach i gcneasú créachta, ach d’fhéadfadh difríochtaí in éifeachtúlacht fhrithmhiocróbach a bheith mar thoradh ar na foirmlithe agus na modhanna seachadta éagsúla 18. Thairis sin, níl airíonna antaibheathach-bhithfhilmeacha córas seachadta airgid sonracha tuigthe go hiomlán. Cé go bhfuil freagairt imdhíonachta an óstaigh réasúnta éifeachtach i gcoinne baictéar planctónach, is gnách go mbíonn sé níos lú éifeachtach i gcoinne bithfhilmeacha 19. Déantar baictéir phlanctónacha a fhagócítóisiú go héasca ag macrafagaigh, ach laistigh de bhithfhilmeacha, cruthaíonn cealla comhiomlánaithe fadhbanna breise trí theorainn a chur leis an bhfreagairt óstaigh a mhéid is féidir le cealla imdhíonachta dul faoi apoptosis agus fachtóirí pró-athlastacha a scaoileadh chun an freagairt imdhíonachta a fheabhsú 20. Breathnaíodh gur féidir le roinnt leukocytes dul trí bhithfhilmeacha 21 ach nach bhfuil siad in ann baictéir a fhagócítóisiú a luaithe a chuirtear an chosaint seo i mbaol 22. Ba cheart cur chuige iomlánaíoch a úsáid chun tacú le freagairt imdhíonachta an óstaigh i gcoinne ionfhabhtú bithfhilm chréachta. Is féidir le díbhrídiú créachta cur isteach go fisiciúil ar an bhithfhilm agus an chuid is mó den bhithualach a bhaint, ach d’fhéadfadh freagairt imdhíonachta an óstaigh a bheith neamhéifeachtach i gcoinne an bhithfhilm atá fágtha, go háirithe má chuirtear isteach ar fhreagairt imdhíonachta an óstaigh. Dá bhrí sin, is féidir le teiripí frithmhiocróbacha amhail feistis airgid tacú le freagairt imdhíonachta an óstaigh agus ionfhabhtuithe bithfhilm a dhíchur. Is féidir le comhdhéanamh, tiúchan, intuaslagthacht agus foshraith seachadta tionchar a imirt ar éifeachtacht fhrithmhiocróbach airgid. Le blianta beaga anuas, tá dul chun cinn i dteicneolaíocht próiseála airgid tar éis na feistis seo a dhéanamh níos éifeachtaí9,23. De réir mar a théann teicneolaíocht feistis airgid chun cinn, tá sé tábhachtach tuiscint a fháil ar éifeachtacht na bhfeistis seo maidir le hionfhabhtú créachta a rialú agus, níos tábhachtaí fós, tionchar na bhfoirmeacha cumhachtacha airgid seo ar thimpeallacht agus ar leigheas na créachta.
Sa staidéar seo, rinneamar comparáid idir éifeachtacht dhá chóiriú airgid ardleibhéil agus cóirithe airgid traidisiúnta a tháirgeann iain Ag1+ i gcoinne bithfhilm ag baint úsáide as samhlacha in vitro agus in vivo éagsúla. Rinneamar measúnú freisin ar éifeacht na gcóirithe seo ar thimpeallacht na créachta agus ar leigheas neamhspleách ar ionfhabhtú. Chun tionchar an mhaitrís seachadta a íoslaghdú, bhí na cóirithe airgid uile a tástáladh comhdhéanta de charbocsaimeitiliceallalós.
Léiríonn ár réamhmheastóireacht ar na cóirithe airgid seo i gcoinne bithfhilm choilíneacha de Pseudomonas aeruginosa agus Staphylococcus aureus, murab ionann agus cóirithe traidisiúnta Ag1+, go bhfuil dhá chóiriú airgid chun cinn, Ag1+ + EDTA/BC agus salainn Ag ocsaiginithe, éifeachtach ag 5. Maraíonn siad baictéir bithfhilm go héifeachtach laistigh de chúpla lá. Ina theannta sin, cuireann na cóirithe seo cosc ar athfhoirmiú bithfhilm ar nochtadh arís agus arís eile do bhaictéir phlanctónacha. Bhí clóiríd airgid, an comhdhúil airgid agus maitrís bonn céanna agus atá in Ag1+ + EDTA/BC, sa chóiriú Ag1+, agus ní raibh mórán éifeacht aige ar inmharthanacht baictéarach laistigh den bithfhilm thar an tréimhse chéanna. Tacaíonn an breathnóireacht gur éifeachtaí cóiriú Ag1+ + EDTA/BC i gcoinne bithfhilm ná cóiriú Ag1+ ina raibh an maitrís chéanna agus comhdhúil airgid leis an tuairim go bhfuil gá le comhábhair bhreise chun éifeachtacht clóiríd airgid i gcoinne bithfhilm a mhéadú, mar a tuairiscíodh in áit eile15. Tacaíonn na torthaí seo leis an smaoineamh go bhfuil ról breise ag BC agus EDTA maidir le héifeachtacht fhoriomlán na bhfeistis agus go bhféadfadh easpa an chomhpháirte seo i bhfeistis Ag1+ a bheith ina chúis leis an mainneachtain éifeachtúlacht in vitro a léiriú. Fuaireamar amach go raibh éifeachtúlacht fhrithbhaictéarach níos láidre ag feistis salainn Ag ocsaiginithe a tháirgeann iain Ag2+ agus Ag3+ ná Ag1+ agus ag leibhéil cosúil le EDTA/BC Ag1+ +. Mar sin féin, mar gheall ar an acmhainneacht ard ocsaídiúcháin-laghdaithe, níl sé soiléir cé chomh fada agus a fhanann iain Ag3+ gníomhach agus éifeachtach i gcoinne bithscannán créachta agus dá bhrí sin is fiú tuilleadh staidéir a dhéanamh orthu. Ina theannta sin, tá go leor feistis éagsúla ann a ghineann iain Ag1+ nár tástáladh sa staidéar seo. Tá na feistis seo comhdhéanta de chomhdhúile airgid, tiúchain agus maitrísí bonn éagsúla, a d'fhéadfadh tionchar a imirt ar sheachadadh ian Ag1+ agus a n-éifeachtúlacht i gcoinne bithscannán. Is fiú a thabhairt faoi deara freisin go bhfuil go leor samhlacha in vitro agus in vivo éagsúla in úsáid chun éifeachtacht feistis créachta i gcoinne bithscannán a mheas. Beidh tionchar ag an gcineál samhla a úsáidtear, chomh maith le hábhar salainn agus próitéine na meán a úsáidtear sna samhlacha seo, ar éifeachtacht an fheistis. Inár samhail in vivo, lig muid don bhithfhilm aibiú in vitro agus ansin aistríomar é chuig dromchla deirmeach na créachta. Tá freagairt imdhíonachta lucha an óstaigh réasúnta éifeachtach i gcoinne baictéir phlanctónacha a chuirtear ar an chréacht, rud a chruthaíonn bithfhilm de réir mar a leigheasann an chréacht. Cuireann cur bithfhilm aibí le créacht teorainn le héifeachtacht fhreagairt imdhíonachta an óstaigh ar fhoirmiú bithfhilm trí ligean don bhithfhilm aibí é féin a bhunú laistigh den chréacht sula dtosaíonn an cneasú. Dá bhrí sin, tugann ár samhail deis dúinn éifeachtacht feistis fhrithmhiocróbach ar bhithfhilmeanna aibí a mheas sula dtosaíonn créachta ag cneasú.
Fuaireamar amach freisin go raibh tionchar ag oiriúnacht an fheistis ar éifeachtacht na bhfeistis airgid ar bhioscannáin a fhástar in vitro agus ar chraiceann muice. Meastar go bhfuil dlúth-theagmháil leis an chréacht ríthábhachtach d’éifeachtúlacht fhrithmhiocróbach an fheistis24,25. Bhí feistis ina raibh salainn Ag ocsaiginithe i ndlúth-theagmháil le bithscannáin aibí, rud a d’fhág laghdú suntasach ar líon na mbaictéar inmharthana laistigh den bhioscannán tar éis 24 uair an chloig. I gcodarsnacht leis sin, nuair a rinneadh cóireáil orthu le feistis Ag1+ agus Ag1+ + EDTA/BC, d’fhan líon suntasach baictéar inmharthana. Tá fuálacha sna feistis seo feadh fhad iomlán an fheistis, rud a chruthaíonn spásanna marbha a chuireann cosc ar dhlúth-theagmháil leis an mbioscannán. Inár staidéir in vitro, chuir na limistéir neamh-theagmhála seo cosc ar mharú baictéar inmharthana laistigh den bhioscannán. Ní dhearnamar measúnú ar inmharthanacht baictéarach ach amháin tar éis 24 uair an chloig de chóireáil; Le himeacht ama, de réir mar a éiríonn an feistis níos sáithithe, d’fhéadfadh níos lú spáis marbh a bheith ann, rud a laghdaíonn an limistéar do na baictéir inmharthana seo. Mar sin féin, leagann sé seo béim ar thábhacht chomhdhéanamh an fheistis, ní hamháin an cineál airgid atá sa fheistis.
Cé go bhfuil staidéir in vitro úsáideach chun éifeachtacht teicneolaíochtaí éagsúla airgid a chur i gcomparáid, tá sé tábhachtach freisin tuiscint a fháil ar éifeachtaí na bhfeistis seo ar bhithfhilmeanna in vivo, áit a gcuireann fíochán óstach agus freagairtí imdhíonachta le héifeachtacht na bhfeistis i gcoinne bhithfhilmeanna. Breathnaíodh éifeacht na bhfeistis seo ar bhithfhilmeanna créachta ag baint úsáide as micreascópacht leictreon scanadh agus daite EPS an bhithfhilm ag baint úsáide as ruaimeanna DNA incheallacha agus eachtarcheallacha. Fuaireamar amach, tar éis 3 lá cóireála, go raibh na feistis uile éifeachtach maidir le DNA saor ó chealla a laghdú i gcréachta atá ionfhabhtaithe le bhithfhilmeanna, ach ní raibh an feistis Ag1+ chomh héifeachtach i gcréachta atá ionfhabhtaithe le Staphylococcus aureus. Léirigh micreascópacht leictreon scanadh freisin go raibh i bhfad níos lú baictéar i láthair i gcréachta a ndearnadh cóireáil orthu leis na feistis airgid, cé go raibh sé seo níos suntasaí leis an bhfeistis salann Ag ocsaiginithe agus an feistis Ag1+ + EDTA/BC i gcomparáid leis an bhfeistis Ag1+. Léiríonn na sonraí seo go raibh céimeanna éagsúla tionchair ag na feistis airgid a tástáladh ar struchtúr an bhithfhilm, ach ní raibh aon cheann de na feistis airgid in ann an bhithfhilm a dhíothú, rud a thacaíonn leis an ngá atá le cur chuige iomlánaíoch maidir le cóireáil ionfhabhtuithe bhithfhilmeanna créachta; úsáid bandaí láimhe airgid. Déantar díbridement fisiceach roimh an gcóireáil chun an chuid is mó den bhithfhilm a bhaint.
Is minic a bhíonn créachta ainsealacha i riocht athlasadh dian, agus fanann cealla athlastacha breise i bhfíochán na créachta ar feadh tréimhse fada ama, rud a fhágann damáiste fíocháin agus a ídíonn an ocsaigin atá riachtanach le haghaidh meitibileacht cheallach agus feidhm éifeachtach sa chréacht26. Cuireann bithscannáin leis an timpeallacht naimhdeach créachta seo trí dhrochthionchar a imirt ar an gcneasú ar bhealaí éagsúla, lena n-áirítear cosc a chur ar iomadú agus imirce cealla agus gníomhachtú cítocíní pró-athlastacha27. De réir mar a éiríonn feistis airgid níos éifeachtaí, tá sé tábhachtach an tionchar atá acu ar thimpeallacht na créachta agus ar an gcneasú a thuiscint.
Is suimiúil é, cé gur chuir na feistis airgid uile isteach ar chomhdhéanamh an bhithfhilm, gur mhéadaigh feistis salainn airgid ocsaiginithe ath-eipitealúcháin na gcréachta ionfhabhtaithe seo. Tacaíonn na sonraí seo lenár dtorthaí roimhe seo17 agus le torthaí Kalan et al. (2017)28, a léirigh próifílí sábháilteachta agus tocsaineachta maithe salainn airgid ocsaiginithe, toisc go raibh tiúchain níos ísle airgid éifeachtach i gcoinne bithfhilm.
Leagann ár staidéar reatha béim ar na difríochtaí i dteicneolaíocht airgid idir feistis airgid frithmhiocróbacha agus tionchar na teicneolaíochta seo ar thimpeallacht na créachta agus ar leigheas neamhspleách ar ionfhabhtú. Mar sin féin, tá na torthaí seo difriúil ó staidéir roimhe seo a léirigh gur fheabhsaigh feistis Ag1+ + EDTA/BC paraiméadair cneasaithe chluasa coinín gortaithe in vivo. Mar sin féin, d'fhéadfadh sé seo a bheith mar gheall ar dhifríochtaí i samhlacha ainmhithe, amanna tomhais, agus modhanna cur i bhfeidhm baictéarach29. Sa chás seo, tógadh tomhais créachta 12 lá tar éis an díobhála chun ligean do chomhábhair ghníomhacha an fheistis gníomhú ar an mbithfhilm thar thréimhse níos faide ama. Tacaíonn staidéar leis seo a léirigh gur mhéadaigh othrais chos ionfhabhtaithe go cliniciúil a ndearnadh cóireáil orthu le Ag1+ + EDTA/BC i méid ar dtús tar éis seachtaine amháin de chóireáil, agus ansin thar na 3 seachtaine ina dhiaidh sin de chóireáil le Ag1+ + EDTA/BC agus laistigh de 4 seachtaine ó úsáid drugaí neamh-frithmhiocróbacha. Feistis CMC chun méid othrais a laghdú30.
Léiríodh roimhe seo go bhfuil foirmeacha agus tiúchain áirithe airgid cíteatocsaineach in vitro 11, ach ní bhíonn fo-iarsmaí díobhálacha in vivo mar thoradh ar na torthaí in vitro seo i gcónaí. Ina theannta sin, tá forbairt go leor feistis airgid sábháilte agus éifeachtacha mar thoradh ar dhul chun cinn i dteicneolaíocht airgid agus tuiscint níos fearr ar chomhdhúile agus tiúchain airgid i bhfeistis. Mar sin féin, de réir mar a théann teicneolaíocht feistis airgid chun cinn, tá sé tábhachtach tionchar na bhfeistis seo ar thimpeallacht na créachta a thuiscint31,32,33. Tuairiscíodh roimhe seo go bhfreagraíonn an ráta méadaithe ath-eipitealaithe do chion méadaithe de mhacrófagáin frith-athlastacha M2 i gcomparáid leis an bhfeinítíopa M1 pró-athlastach. Tugadh faoi deara é seo i samhail luiche roimhe seo inar cuireadh feistis chréachta hidrogel airgid i gcomparáid le sulfadiazine airgid agus hidrogels neamh-frithmhiocróbacha34.
D’fhéadfadh athlasadh iomarcach a bheith le feiceáil i gcréachta ainsealacha agus breathnaíodh go bhféadfadh barraíocht neodróifilí a bheith díobhálach do leigheas créachta35. I staidéar i lucha a raibh easpa neodróifilí orthu, chuir láithreacht neodróifilí moill ar ath-epitéiliú. Mar thoradh ar bharraíocht neodróifilí, bíonn leibhéil arda próitéáis agus speiceas ocsaigine imoibríoch, amhail sárocsaíd agus sárocsaíd hidrigine, a bhaineann le créachta ainsealacha agus créachta mall-leighis37,38. Mar an gcéanna, is féidir le méadú ar líon macrófagaí, mura ndéantar é a rialú, moill a chur ar leigheas créachta39. Tá an méadú seo thar a bheith tábhachtach mura bhfuil macrófagaí in ann aistriú ó fheinotíopa pró-athlastach go feinitoipe pró-leighis, rud a fhágann nach n-éiríonn le créachta an chéim athlastach leighis a fhágáil40. Thugamar faoi deara laghdú ar neodróifilí agus macrófagaí i gcréachta atá ionfhabhtaithe le bithfhilm tar éis 3 lá de chóireáil le gach feistis airgid, ach bhí an laghdú níos suntasaí le feistis salainn ocsaiginithe. D’fhéadfadh an laghdú seo a bheith mar thoradh díreach ar an bhfreagairt imdhíonachta ar airgead, ar fhreagairt ar laghdú ar ualach bitheolaíoch, nó ar an chréacht a bheith i gcéim níos déanaí den leigheas agus dá bhrí sin laghdú ar chealla imdhíonachta sa chréacht. D’fhéadfadh laghdú ar líon na gcealla athlastacha sa chréacht timpeallacht a choinneáil a thacaíonn le leigheas créachta. Níl an mheicníocht gníomhaíochta maidir le conas a chuireann ocsa-shalainn Ag leigheas neamhspleách ar ionfhabhtú chun cinn soiléir, ach d’fhéadfadh cumas ocsa-shalainn Ag ocsaigin a tháirgeadh agus leibhéil dhíobhálacha sárocsaíd hidrigine, idirghabhálaí athlasadh, a scriosadh a mhíniú seo agus tá gá le tuilleadh staidéir air17.
Is fadhb do dhochtúirí agus d’othair araon créachta ionfhabhtaithe ainsealacha nach bhfuil ag cneasú. Cé go maíonn go leor feistis go bhfuil siad éifeachtach ó thaobh frithmhiocróbach de, is annamh a dhíríonn an taighde ar fhachtóirí tábhachtacha eile a mbíonn tionchar acu ar mhicri-thimpeallacht na créachta. Léiríonn an staidéar seo go bhfuil éifeachtúlacht fhrithmhiocróbach éagsúil ag teicneolaíochtaí éagsúla airgid agus, níos tábhachtaí fós, éifeachtaí éagsúla ar thimpeallacht agus ar leigheas na créachta, neamhspleách ar ionfhabhtú. Cé go léiríonn na staidéir in vitro agus in vivo seo éifeachtacht na bhfeistis seo maidir le hionfhabhtuithe créachta a chóireáil agus leigheas a chur chun cinn, tá gá le trialacha rialaithe randamaithe chun éifeachtacht na bhfeistis seo sa chlinic a mheas.
Tá na tacair sonraí a úsáideadh agus/nó a ndearnadh anailís orthu le linn an staidéir reatha ar fáil ón údar comhfhreagrach ar iarratas réasúnta.
Am an phoist: 15 Iúil 2024