• sinne

Éifeacht frith-bhithfilm agus spreagadh cóirithe níotráite airgid

Go raibh maith agat as cuairt a thabhairt ar Nature.com. Tá tacaíocht teoranta CSS ag an leagan den bhrabhsálaí atá á úsáid agat. Le haghaidh na dtorthaí is fearr, molaimid duit leagan níos nuaí de do bhrabhsálaí a úsáid (nó modh comhoiriúnachta a dhíchumasú i Internet Explorer). Idir an dá linn, chun tacaíocht leanúnach a chinntiú, táimid ag taispeáint an tsuímh gan styling ná JavaScript.
Is minic a léiríonn fás miocróbach i gcréachtaí é féin mar bhithbhreoslaí, a chuireann isteach ar leigheas agus atá deacair a dhíothú. Éilíonn cóiriú airgid nua go dtéann siad i ngleic le hionfhabhtuithe créachta, ach ní bhíonn a n-éifeachtúlacht antasubstainte agus a n-éifeachtaí cneasaithe neamhspleácha ionfhabhtaithe anaithnid go ginearálta. Ag baint úsáide as samhlacha bithbhreoslaí in vitro agus in vivo de Staphylococcus aureus agus Pseudomonas aeruginosa, tuairiscímid éifeachtúlacht cóirithe giniúna AG1+; Cóirithe AG1+ ina bhfuil aigéad eitylenediaminetetraacetic agus clóiríd beinsea -imiam (AG1+/EDTA/BC), agus cóiriú ina bhfuil níotráit airgid (AG OxySalts). , a tháirgeann iain Ag1+, Ag2+ agus AG3+ chun dul i ngleic le bithbhreoslaí créachta agus a éifeacht ar leigheas. Ní raibh mórán éifeachtaí ag cóiriú AG1+ ar bhithbhreosla créachta in vitro agus i lucha (C57BL/6J). I gcodarsnacht leis sin, laghdaigh salainn AG1++/EDTA/BC go suntasach líon na mbaictéar inmharthana i mbithbhreoslaí in vitro agus léirigh siad laghdú suntasach ar chomhpháirteanna baictéarach agus EPS i mbithbhreoslaí créachta luiche. Bhí éifeachtaí difriúla ag na cóirithe seo ar chneasú créachtaí bithbhreoslaithe agus neamh-bhithfilm-ionfhabhtaithe, agus tá éifeachtaí níos tairbhiúla ag cóiriú salainn ocsaiginithe ar reepithelialization, méid créachta, agus athlasadh i gcomparáid le cóireálacha rialaithe agus cóirithe airgid eile. D'fhéadfadh éifeachtaí difriúla a bheith ag na hairíonna fisiciceimiceacha éagsúla a bhaineann le cóiriú airgid ar bhithbhreoslaí créachta agus ar leigheas, agus ba chóir é seo a bhreithniú nuair a roghnaítear feistis chun cóireáil a dhéanamh ar chréachtaí bithbhreoslaí atá ionfhabhtaithe.
Sainmhínítear créachtaí ainsealacha mar “chréachtaí a dteipeann orthu dul chun cinn a dhéanamh trí ghnáthchéimeanna leighis ar bhealach ordúil agus tráthúil” 1. Cruthaíonn créachtaí ainsealacha ualach síceolaíoch, sóisialta agus eacnamaíoch d'othair agus don chóras cúraim sláinte. Meastar go bhfuil caiteachas bliantúil NHS ar chóireáil créachtaí agus comorbidities gaolmhara £ 8.3 billiún in 2017–182. Faoi láthair is fadhb mhór iad na créachtaí ainsealacha sna Stáit Aontaithe, agus meastar go bhfuil Medicare ag meas an chostais bhliantúil a bhaineann le cóireáil a dhéanamh ar othair le créachtaí ag $ 28.1– $ 96.8 billiún3.
Is fachtóir mór é an t -ionfhabhtú a chuireann cosc ​​ar leigheas créachta. Is minic a léirítear ionfhabhtuithe mar bhithbhreoslaí, atá i láthair i 78% de chréachtaí ainsealacha neamh-leighis. Foirmíonn bithbhreoslaí nuair a bhíonn miocrorgánaigh ceangailte le dromchlaí, amhail dromchlaí créachta, agus is féidir leo comhiomlán a dhéanamh chun pobail pholaiméirí (EPS) a fhoirmiú. Tá bithbhreosla créachta bainteach le freagairt athlastacha mhéadaithe as a dtiocfaidh damáiste fíochán, ar féidir leis moill a chur ar leigheas4. D'fhéadfadh an méadú ar dhamáiste fíochán a bheith mar thoradh go páirteach ar ghníomhaíocht mhéadaithe miotaloproteinases maitrís, collagenase, elastase agus speicis ocsaigine imoibríoch5. Thairis sin, is tomhaltóirí ard ocsaigine iad cealla athlastacha agus bithbhreoslaí agus dá bhrí sin is féidir leo hypoxia fíochán áitiúil a chur faoi deara, cealla a ídíonn an ocsaigin ríthábhachtach a theastaíonn le haghaidh deisiú fíochán éifeachtach6.
Tá bithbhreoslaí aibí an -fhrithsheasmhach in aghaidh gníomhairí frithmhiocróbacha, a éilíonn straitéisí ionsaitheach chun ionfhabhtuithe bithbhreoslaí a rialú, amhail cóireáil mheicniúil agus cóireáil fhrithmhiocróbach éifeachtach ina dhiaidh sin. Toisc gur féidir le bithbhreoslaí athghiniúint go tapa, is féidir le frithmhiocróbaigh éifeachtacha an baol a bhaineann le hathfhoirmiú a laghdú tar éis miondealú máinliachta7.
Úsáidtear airgead níos mó agus níos mó i gcóirithe frithmhiocróbacha agus is minic a úsáidtear é mar chóireáil chéad líne do chréachtaí ainsealacha ionfhabhtaithe. Tá go leor cóirithe airgid atá ar fáil ar bhonn tráchtála, gach ceann acu ina bhfuil comhdhéanamh airgid, tiúchan, agus maitrís bonn difriúil. Mar thoradh ar dhul chun cinn i mbannaí armála airgid, forbraíodh bandaí nua airgid. Tá an fhoirm mhiotalach airgid (Ag0) támh; Chun éifeachtúlacht fhrithmhiocróbach a bhaint amach, ní mór dó leictreon a chailleadh chun airgead ianach a dhéanamh (Ag1+). Tá comhdhúile airgid nó airgead miotalach i gcóirithe airgid thraidisiúnta a dhianscaoileann, nuair a bhíonn siad nochta do leacht, chun iain Ag1+ a fhoirmiú. Imoibríonn na hiain Ag1+ seo leis an gcill bhaictéarach, ag baint leictreoin ó chomhpháirteanna struchtúracha nó as próisis chriticiúla atá riachtanach chun maireachtáil. Mar thoradh ar theicneolaíocht phaitinnithe forbraíodh cumaisc nua airgid, Ag oxysalts (níotráit airgid, ag7NO11), atá san áireamh i gcóirithe créachta. Murab ionann agus airgead traidisiúnta, cruthaíonn dianscaoileadh salainn ina bhfuil ocsaigin stáit airgid le valence níos airde (Ag1+, Ag2+agus Ag3+). Léirigh staidéir in vitro go bhfuil tiúchan íseal de shalainn airgid ocsaiginithe níos éifeachtaí ná airgead ian aonair (Ag1+) i gcoinne baictéir phataigineacha amhail Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus agus Escherichia coli8,9. Áirítear le cineál nua cóirithe airgid comhábhair bhreise, eadhon aigéad eitylenediaminetetraacetic (EDTA) agus clóiríd benzethonium (BC), a thuairiscítear chun díriú ar EPanna bithbhreoslaí agus a mhéadaíonn treá airgid isteach sa bhithfilm. Tairgeann na teicneolaíochtaí nua airgid seo bealaí nua chun díriú ar bhithbhreoslaí créachta. Mar sin féin, tá tionchar na bhfrithmhiocróbach seo ar an timpeallacht chréachta agus ar an gcneasú ionfhabhtaithe neamhspleách chun a chinntiú nach gcruthaíonn siad timpeallacht chréachta neamhfhabhrach nó moill leighis. Tuairiscíodh imní faoi chíteatocsaineacht airgid in vitro le roinnt cóirithe airgid10,11. Mar sin féin, níor aistríodh cíteatocsaineacht in vitro go tocsaineacht in vivo go fóill, agus léirigh roinnt cóirithe AG1+ próifíl sábháilteachta maith12.
Anseo, rinneamar imscrúdú ar éifeachtacht na gcóirithe carboxymethylcellulose ina raibh foirmlithe airgid núíosacha i gcoinne bithbhreoslaí créachta in vitro agus in vivo. Ina theannta sin, rinneadh measúnú ar éifeachtaí na gcóirithe seo ar fhreagraí imdhíonachta agus ar leigheas neamhspleách ar ionfhabhtú.
Bhí na cóiriúcháin go léir a úsáideadh ar fáil ar bhonn tráchtála. Is é atá i gcóiriú snáithín glóthach 3m Kerracel (3M, Knutsford, an Ríocht Aontaithe) ná cóiriú snáithín glóthach neamh-antimicrobial 100% 100% a úsáideadh mar an chóiriú rialaithe sa staidéar seo. Rinneadh meastóireacht ar thrí chóiriú airgid frithmhiocróbach CMC, eadhon feistis 3M Kerracel AG (3M, Knutsford, an Ríocht Aontaithe), ina bhfuil 1.7 wt%. Salann airgid ocsaiginithe (Ag7NO11) in iain airgid valence níos airde (Ag1+, Ag2+agus Ag3+). Le linn dianscaoileadh AG7NO11, déantar ian AG1+, AG2+ agus AG3+ a fhoirmiú i gcóimheas 1: 2: 4. Aquacel AG Feistis bhreise ina bhfuil 1.2% clóiríd airgid (Ag1+) (convatec, deeside, an Ríocht Aontaithe) 13 agus Aquacel AG+Cóiriú breise ina bhfuil 1.2% clóiríd airgid (Ag1+), EDTA agus Benzethonium Clóiríd (Convatec, Deeside, UK) 14.
Ba iad na tréithchineálacha a úsáideadh sa staidéar seo ná Pseudomonas aeruginosa NCTC 10781 (Public Health England, Salisbury) agus Staphylococcus aureus NCTC 6571 (Public Health England, Salisbury).
Fásadh baictéir thar oíche i mbrat Muller-Hinton (Oxoid, Altrincham, an Ríocht Aontaithe). Rinneadh an cultúr thar oíche a chaolú ansin 1: 100 i brat Mueller-Hinton agus 200 µL plátáilte ar steiriúla 0.2 µm Whatman Cyclopore Melfáin (Whatman Plc, Maidstone, UK) ar Phlátaí Agar Mueller-Hinton (Sigma-Aldrich Company Ltd, Kent, Britain Mór, Britain Mór (Sigma-Ald ). ) Foirmiú bithbhreosla coilíneach ag 37 ° C ar feadh 24 uair an chloig. Rinneadh na bithbhreoslaí coilíneacha seo a thástáil le haghaidh crapadh logartamach.
Gearr an chóiriú i bpíosaí cearnóga 3 cm2 agus réamh-ghluaiseacht le huisce dí-ianaithe steiriúil. Cuir an bindealán thar bhithfhilm an choilíneacht ar an bpláta agar. Baineadh gach 24 heicteár de bhithfhilm, agus rinneadh baictéir inmharthana laistigh den bhithfilm (CFU/ML) a chainníochtú trí chaolú sraithe (10−1 go 10−7) i brat neodraithe an lae (Merck-Millipore). Tar éis 24 uair an chloig de ghoir ag 37 ° C, rinneadh comhaireamh caighdeánach pláta ar phlátaí agar Mueller-Hinton. Rinneadh gach cóireáil agus pointe ama i dtrí chóip, agus rinneadh comhaireamh pláta arís agus arís eile le haghaidh gach caolaithe.
Faightear craiceann bolg muiceola ó mhuca bhána mhóra ban laistigh de 15 nóiméad ón marú de réir chaighdeáin onnmhairithe an Aontais Eorpaigh. Rinneadh an craiceann a shaved agus a ghlanadh le wipes alcóil, ansin reoite ag -80 ° C ar feadh 24 uair an chloig chun an craiceann a dhíspreagadh. Tar éis leá, glanadh píosaí craicinn 1 cm2 trí huaire le PBS, 0.6% sóidiam fochlóirít, agus 70% eatánól ar feadh 20 nóiméad gach uair. Sula mbaintear an eipideirm, bain aon eatánól atá fágtha trí níochán 3 huaire i PBS steiriúil. Saothraíodh an craiceann i bpláta 6-tobair le membrane níolóin 0.45-μm-tiubh (Merck-Millipore) ar an mbarr agus 3 phillín ionsúite (Merck-Millipore) ina raibh 3 serum bólachta féatais (Sigma) le 10% Dulbecco modhnaithe Iolar. Meánach (Meánach Athraithe Dulbecco - Aldrich Ltd.).
Fásadh bithbhreoslaí coilíneachta mar a thuairiscítear le haghaidh staidéar nochta bithfhilm. Tar éis dó an bithbhreoslaí a shaothrú ar an scannán ar feadh 72 uair an chloig, cuireadh an bithbhreoslaí i bhfeidhm ar dhromchla an chraicinn ag baint úsáide as lúb ionaclaithe steiriúil agus baineadh an scannán. Rinneadh an bithbhreosla a ghoradh ansin ar dheirm na muc ar feadh 24 uair an chloig breise ag 37 ° C chun ligean don bhithbhreos aibí agus cloí le craiceann na muc. Tar éis don bhithfhilm aibiú agus a bheith ceangailte, cuireadh cóiriú 1.5 cm2, a cuireadh roimh ré le huisce driogtha steiriúil, i bhfeidhm go díreach ar dhromchla an chraicinn agus é a ghoradh ag 37 ° C ar feadh 24 uair an chloig. Rinneadh baictéir inmharthana a shamhlú trí imoibrí inmharthanachta cille prestoblue a chur i bhfeidhm go haonfhoirmeach (Invitrogen, Life Technologies, Paisley, an Ríocht Aontaithe) ar dhromchla apical gach rud a chuirfeadh isteach orthu agus é a ghoradh ar feadh 5 nóiméad. Bain úsáid as ceamara digiteach Leica DFC425 chun íomhánna a ghabháil láithreach ar mhicreascóp Leica MZ8. Rinneadh na limistéir daite bándearg a chainníochtú ag baint úsáide as leagan Bogearraí Image Pro 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (Mediacy.com)). Rinneadh micreascópacht leictreon a scanadh mar a thuairiscítear thíos.
Caolaíodh baictéir a fhástar thar oíche 1: 100 i brat Mueller-Hinton. Cuireadh 200 μl de chultúr le membrane cyclopore steiriúil 0.2 μM Whatman (Whatman, Maidstone, UK) agus plátáilte ar Mueller-Hinton Agar. Rinneadh plátaí bithbhreoslaí a ghoradh ag 37 ° C ar feadh 72 uair an chloig chun foirmiú bithbhreoslaí aibí a cheadú.
Tar éis 3 lá de aibiú bithfhilm, cuireadh bindealán cearnógach 3 cm2 go díreach ar an mbithfilm agus é a ghoradh ag 37 ° C ar feadh 24 uair an chloig. Tar éis an bindealán a bhaint as an dromchla bithfhilm, cuireadh 1 ml de imoibrí inmharthanachta cille prestoblue (Invitrogen, Waltham, MA) le dromchla gach bithbhreosla ar feadh 20 soicind. Rinneadh na dromchlaí a thriomú sular taifeadadh athruithe datha ag baint úsáide as ceamara digiteach Nikon D2300 (Nikon UK Ltd., Kingston, an Ríocht Aontaithe).
Ullmhaigh cultúir thar oíche ar Agar Mueller-Hinton, aistrigh coilíneachtaí aonair go 10 ml Mueller-Hinton brat agus goir ar chroiteoir ag 37 ° C (100 rpm). Tar éis goir thar oíche, caolaíodh an cultúr 1: 100 i brat Mueller-Hinton agus feictear 300 µL ar 0.2 µm ciorclach ciclopore membrane (Whatman International, Maidstone, an Ríocht Aontaithe) ar Mueller-Hinton Agar agus a ghoradh ag 37 ° C laistigh de 72 uair an chloig laistigh de 72 uair an chloig . . Cuireadh an bithbhreoslaí aibí i bhfeidhm ar an gclós mar a thuairiscítear thíos.
Rinneadh gach obair le hainmhithe in Ollscoil Mhanchain faoi cheadúnas tionscadail a cheadaigh an Oifig um Athbhreithniú Leasa agus Eiticiúil Ainmhithe (P8721BD27) agus de réir na dtreoirlínte a d'fhoilsigh an Oifig Baile faoi ASPA Athbhreithnithe 2012. Cloí na húdair go léir leis na treoirlínte teachta. Baineadh úsáid as lucha C57BL/6J ocht seachtaine d'aois (Envigo, Oxon, UK) do gach staidéar in vivo. Rinneadh ainéistéisiú ar lucha le isoflurane (Piramal Critical Care Ltd, West Drayton, an Ríocht Aontaithe) agus rinneadh a ndromchlaí droma a shaved agus a ghlanadh. Ansin tugadh créacht eisiach 2 × 6 mm do gach luch ag baint úsáide as punch bithóipse Stiefel (Schuco International, Hertfordshire, an Ríocht Aontaithe). Maidir le créachtaí atá ionfhabhtaithe le bithbhreoslaí, cuir i bhfeidhm bithbhreoslaí coilíneach 72 uair an chloig a fhástar ar an scannán mar a thuairiscítear thuas le ciseal deirmeach na créachta ag baint úsáide as lúb ionaclaithe steiriúil díreach tar éis gortaithe agus an scannán a chaitheamh ar ais. Déantar ceintiméadar cearnógach amháin den chóiriú a réamhchúrsáil le huisce steiriúil chun timpeallacht créachta tais a choinneáil. Cuireadh cóirithe i bhfeidhm go díreach ar gach créachta agus clúdaíodh iad le scannán 3M Tegaderm (3M, Bracknell, UK) agus greamachán leachtach mastisol (Eloquest Healthcare, Ferndale, MI) a cuireadh i bhfeidhm timpeall na n -imill chun greamaitheacht bhreise a sholáthar. Riaradh Buprenorphine (Animalcare, York, UK) ag tiúchan 0.1 mg/kg mar anailgéiseach. Lucha a mhaolú trí lá tar éis gortaithe ag baint úsáide as an modh Sceideal 1 agus bain an limistéar créachta, agus stórálfaidh siad, agus stórálann siad an limistéar créachta de réir mar is gá.
Rinneadh staining hematoxylin (Thermofisher Scientific) agus Eosin (Thermofisher Scientific) de réir phrótacal an déantóra. Rinneadh limistéar créachta agus reepithelialization a chainníochtú ag baint úsáide as leagan bogearraí Image Pro 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD).
Rinneadh rannóga fíocháin a dhí -ocsaídiú i xiléin (Thermofisher Scientific, Loughborough, an Ríocht Aontaithe), athhiodráitithe le eatánól grádaithe 100-50%, agus tumtha go hachomair in uisce dí -ianaithe (Thermofisher Scientific). Rinneadh Immunohistochemistry ag baint úsáide as paca Vectastain Elite ABC PK-6104 (Vector Laboratories, Burlingame, CA) de réir phrótacal an déantóra. Caolaíodh antasubstaintí príomhúla le neutrophils NIMP-R14 (Termofisher Scientific) agus macrophages MS CD107B Pure M3/84 (BD Biosciences, Wokingham, an Ríocht Aontaithe) 1: 100 i dtuaslagán blocála agus cuireadh leis an dromchla gearrtha iad, agus 2 fhrith-antashubstaintí ina dhiaidh sin, vectastain vectastain ABC agus Veicteoir Nova Peroxidase Red Peroxidase (HRP) Kit Substráit (Saotharlanna Veicteoir, Burlingame, CA) agus iad a chomhdhlúthú le hematoxylin. Fuarthas íomhánna ag baint úsáide as micreascóp Olympus BX43 agus ceamara digiteach Olympus DP73 (Olympus, Southend-on-Sea, an Ríocht Aontaithe).
Socraíodh samplaí craicinn i 2.5% glutaraldehyde agus formaildéad 4% i 0.1 M HEPES (pH 7.4) ar feadh 24 uair an chloig ag 4 ° C. Rinneadh díhiodráitiú ar shamplaí ag baint úsáide as eatánól grádaithe agus triomaíodh iad i CO2 ag baint úsáide as triomadóir pointe criticiúil K850 (Quorum Technologies Ltd, Loughton, an Ríocht Aontaithe) agus sputter brataithe le cóimhiotal ór-phallaidiam ag baint úsáide as córas sputterer/glow urscaoilte/Glow. Rinneadh na heiseamail a íomháú ag baint úsáide as micreascóp leictreon scanadh FEI Quanta 250 (Eolaíocht Thermofisher) chun pointe lárnach na créachta a shamhlú.
Cuireadh Toto-1 iaidíd (2 μM) i bhfeidhm ar dhromchla an chréite luch eisiata agus rinneadh é a ghoradh ar feadh 5 nóiméad ag 37 ° C (termofisher eolaíoch) agus a caitheadh ​​le SYTO-60 (10 μm) ag 37 ° C (Eolaíocht Thermofisher). Cruthaíodh íomhánna 15 nóiméad Z-Stack ag baint úsáide as Leica TCS SP8.
Rinneadh táblaí agus anailís ar shonraí macasamhlaithe bitheolaíocha agus teicniúla ag baint úsáide as bogearraí GraphPad Prism V9 (GraphPad Software, La Jolla, CA). Baineadh úsáid as anailís aontreo ar athraitheas le comparáidí iolracha ag baint úsáide as tástáil iar-hoc Dunnett chun tástáil a dhéanamh ar dhifríochtaí idir gach cóireáil agus an chóiriú rialaithe neamh-antimicrobial. Measadh go raibh luach p <0.05 suntasach.
Rinneadh measúnú ar éifeachtacht na gcóirithe snáithíní glóthaí airgid ar dtús i gcoinne coilíneachtaí bithbhreoslaí Staphylococcus aureus agus Pseudomonas aeruginosa in vitro. Tá foirmlí difriúla airgid i gcóirithe airgid: táirgeann cóiriú airgid traidisiúnta ian++; Is féidir le cóiriú airgid, ar féidir leo iain AG1+ a tháirgeadh tar éis EDTA/BC a chur leis, an mhaitrís bithfhilm a scriosadh agus baictéir a nochtadh go hairgead faoi éifeacht antaibheathach airgid. ian15 agus cóiriú ina bhfuil salainn AG ocsaiginithe a tháirgeann ian AG1+, Ag2+ agus Ag3+. Cuireadh a éifeachtúlacht i gcomparáid le cóiriú rialaithe neamh-antimicrobial a rinneadh as snáithíní gelled. Rinneadh measúnú ar na baictéir inmharthana a bhí fágtha laistigh den bhithfilm gach 24 uair an chloig ar feadh 8 lá (Figiúr 1). Ar an lá 5, athdhearbhaíodh an bithbhreoslaí le 3.85 × 105s. Staphylococcus aureus nó 1.22 × 105p. Aeruginosa chun téarnamh bithbhreoslaí a mheas. I gcomparáid le cóirithe rialaithe neamh-antimicrobial, ní raibh mórán éifeacht ag cóiriú Ag1+ ar inmharthanacht baictéarach i Staphylococcus aureus agus Pseudomonas aeruginosa bithbhreoslaí thar 5 lá. I gcodarsnacht leis sin, bhí cóiriú ina bhfuil salainn Ocsaiginithe AG agus Ag1 + + EDTA/BC éifeachtach maidir le baictéir a mharú laistigh den bhithbhreoslaí laistigh de 5 lá. Tar éis ionaclaithe arís agus arís eile le baictéir phlanctóin ar lá 5, níor breathnaíodh aon athchóiriú ar an mbithfilm (Fíor 1).
Cainníochtú baictéir inmharthana i Staphylococcus aureus agus Pseudomonas aeruginosa bithbhreoslaí tar éis cóireála le cóiriú airgid. Déileáladh le coilíneachtaí bithbhreoslaí de Staphylococcus aureus agus Pseudomonas aeruginosa le cóiriú airgid nó cóirithe rialaithe neamh-antimicrobial, agus socraíodh líon na mbaictéar inmharthana a bhí fágtha gach 24 uair an chloig. Tar éis 5 lá, rinneadh an bithbhreoslaí a athchruthú le 3.85 × 105s. Staphylococcus aureus nó 1.22 × 105p. Cruthaíodh coilíneachtaí an bhacterioplankton Pseudomonas aeruginosa ina n -aonar chun measúnú a dhéanamh ar aisghabháil bithbhreoslaí. Taispeánann graif an earráid +/- caighdeánach.
Chun an éifeacht a bhíonn ag cóiriú airgid ar inmharthanacht bithbhreoslaí a shamhlú, cuireadh cóiriú i bhfeidhm ar bhithbhreoslaí aibí a fhástar ar chraiceann porcine ex vivo. Tar éis 24 uair an chloig, baintear an chóiriú agus déantar an bithbhreosla a dhathú le dath imoibríoch gorm, a mheitibilítear trí bhaictéir bheo go dath bándearg. Bhí bithbhreoslaí a ndéileáiltear leo le cóiriú rialaithe bándearg, rud a léiríonn go raibh baictéir inmharthana laistigh den bhithbhreoslaí (Figiúr 2A). I gcodarsnacht leis sin, bhí an bithbhreoslaí a cóireáladh leis an gcóiriú ag Oxysols gorm go príomha, ag léiriú gur baictéir neamh -inmharthana iad na baictéir eile ar dhromchla chraiceann na muc (Figiúr 2B). Breathnaíodh dath gorm agus bándearg measctha i mbithbhreoslaí a ndéileáiltear leo le cóiriúcháin Ag1++, ag léiriú go raibh baictéir inmharthana agus neamh-inmharthana laistigh den bhithfhilm (Figiúr 2C), cé go raibh cóirithe EDTA/BC ina raibh Ag1+ gorm den chuid is mó le roinnt spotaí bándearg. ag léiriú limistéir nach bhfuil tionchar ag an gcóiriú airgid orthu (Figiúr 2D). Léirigh cainníochtú na gceantar gníomhach (bándearg) agus neamhghníomhach (gorm) go raibh an paiste rialaithe 75% gníomhach (Figiúr 2E). Rinne cóiriú AG1 + + EDTA/BC mar an gcéanna le cóiriú salainn Ocsaiginithe, le rátaí marthanais de 13% agus 14%, faoi seach. Laghdaigh an chóiriú Ag1+ inmharthanacht baictéarach freisin 21%. Breathnaíodh na bithbhreoslaí seo ansin ag baint úsáide as micreascópacht leictreon scanadh (SEM). Tar éis cóireála leis an gcóiriú rialaithe agus an chóiriú Ag1+, breathnaíodh sraith de Pseudomonas aeruginosa ag clúdach an chraicinn muc (Figiúr 2F, H), ach tar éis cóireála leis an gcóiriú Ag1+, fuarthas cúpla cealla baictéarach agus is beag cealla baictéarach a fuarthas thíos. Is féidir snáithíní collagen a mheas mar struchtúr fíochán an chraicinn muc (Figiúr 2G). Tar éis cóireála le cóiriú Ag1 + + EDTA/BC, bhí plaiceanna baictéaracha agus plaiceanna snáithín collagen bunúsach le feiceáil (Figiúr 2i).
Léirshamhlú pseudomonas aeruginosa biofilm tar éis cóireála cóirithe airgid. (A-D) Rinneadh inmharthanacht baictéarach i Pseudomonas aeruginosa a fhástar ar chraiceann muc a shamhlú ag baint úsáide as dath inmharthanachta prestoblue 24 uair an chloig tar éis cóireála le cóiriú airgid nó cóirithe rialaithe neamh-antimicrobial. Tá baictéir bheo bándearg, neamh-inmharthana agus tá craiceann muc gorm. . Barra scála SEM = 5 µm. (J -M) D'fhás bithbhreoslaí coilíneachta ar scagairí agus rinneadh iad a dhathú le dath imoibríoch prestoblue tar éis 24 h goir le cóiriú airgid.
Chun a chinneadh an raibh tionchar ag dlúth -theagmháil idir na cóirithe agus na bithbhreoslaí ar éifeachtacht na gcóirithe, déileáladh le bithbhreoslaí coilíneacha a cuireadh ar dhromchla réidh leis na cóirithe ar feadh 24 uair an chloig agus ansin rinneadh iad a dhathú le ruaimeanna imoibríocha. Bhí dath bándearg dorcha bándearg ar an mbithfilm neamhchóireáilte (Figiúr 2J). I gcodarsnacht le bithbhreoslaí a ndéileáiltear leo le cóirithe ina bhfuil salainn AG ocsaiginithe (Figiúr 2K), léirigh bithbhreoslaí a ndéileáiltear leo le cóirithe ina bhfuil Ag1+ nó Ag1++ EDTA/BC bandaí de dhathú bándearg (Figiúr 2L, M). Léiríonn an dath bándearg seo go bhfuil baictéir inmharthana i láthair agus go bhfuil baint aige leis an limistéar uaim laistigh den chóiriú. Cruthaíonn na limistéir fuaite seo spásanna marbh a cheadaíonn do bhaictéir laistigh den bhithbhreoslaí maireachtáil.
Chun measúnú a dhéanamh ar éifeachtúlacht na gcóirithe airgid in vivo, caitheadh ​​le créachtaí lán-tiús lucha atá ionfhabhtaithe le S. aureus aibí agus P. aeruginosa bithbhreoslaí le cóirithe rialaithe nonantimicrobial nó cóirithe airgid. Tar éis 3 lá de chóireáil, léirigh anailís íomhá macrascópach méideanna níos lú créachta nuair a cóireáladh iad le cóiriú salainn ocsaiginithe i gcomparáid le cóirithe rialaithe neamh-antimicrobial agus cóirithe airgid eile (Figiúr 3A-H). Chun na breathnuithe seo a dheimhniú, rinneadh créachtaí a lománaíocht agus rinneadh an limistéar créachta a chainníochtú agus rinneadh cainníochtú ar chodanna fíochán hematoxylin agus eosin-dhaite ag baint úsáide as leagan Bogearraí Pro 10 (Figiúr 3i-L).
An éifeacht a bhíonn ag cóiriú airgid ar dhromchla na créachta agus ath-epithelialization créachtaí atá ionfhabhtaithe le bithbhreoslaí. (A -H) Cealla beaga atá ionfhabhtaithe le bithbhreoslaí de Pseudomonas aeruginosa (A - D) agus Staphylococcus aureus (E -H) tar éis trí lá cóireála le cóiriú rialaithe neamh -chomharthaíochta, cóiriú salann AG1+, agus feistis AG1+, feistis salann AG1+, agus an AG1+ cóiriú Ag1+ cóiriú. Íomhánna ionadaíocha macrascópacha. Créachtaí lucha le cóiriú Ag1 + + EDTA/BC. (IL) Ionadaí Pseudomonas aeruginosa ionfhabhtú, codanna histeolaíochta atá daite le hematoxylin agus eosin, a úsáidtear chun limistéar créachta agus athghiniúint epithelial a chainníochtú. Cainníochtú an limistéir chréachta (m, o) agus céatadán reepithelialization (n, p) de chréachtaí atá ionfhabhtaithe le pseudomonas aeruginosa (m, n) agus staphylococcus aureus (o, p) bithbhreoslaí (in aghaidh an ghrúpa cóireála n = 12). Taispeánann graif an earráid +/- caighdeánach. Ciallaíonn * ciallaíonn p = <0.05 ** ciallaíonn p = <0.01; Scála macrascópach = 2.5 mm, scála histeolaíochta = 500 µm.
Léirigh cainníocht an limistéir chréachta i gcréachtaí atá ionfhabhtaithe le pseudomonas aeruginosa biofilm (Figiúr 3M) go raibh meánmhéid créachta de 2.5 mm2 ag créachtaí a ndéileáiltear leo le Ag oxysalts, agus go raibh meánmhéid créachta de 3.1 mm2 ag an gcóiriú neamh-antimicrobial, nach bhfuil ann, nach bhfuil ann nach bhfuil ann nach bhfuil ann nach bhfuil ann nach bhfuil ann nach bhfuil Fíor. tábhacht staitistiúil bainte amach (Figiúr 3M). P = 0.423). Léirigh créachtaí a ndéileáiltear leo le Ag1+ nó AG1++ EDTA/BC aon laghdú ar limistéar créachta (3.1 mm2 agus 3.6 mm2, faoi seach). Cóireáil le cóiriú salainn Ocsaiginithe Ag a chuir ath-epithelialization chun cinn níos mó ná an chóiriú rialaithe neamh-antimicrobial (34% agus 15%, faoi seach; P = 0.029) agus Ag1+ nó Ag1++ EDTA/BC (10% agus 11%) ((10% agus 11%) ((10% agus 11%) ((10% agus 11%) ( Figiúr 3n). . , faoi seach).
Breathnaíodh treochtaí comhchosúla i limistéar créachta agus athghiniúint epithelial i gcréachtaí atá ionfhabhtaithe le bithbhreoslaí S. aureus (Figiúr 3o). Laghdaigh cóirithe ina bhfuil salainn airgid ocsaiginithe achar créachta (2.0 mm2) 23% i gcomparáid leis an gcóiriú neamh-antimicrobial rialaithe (2.6 mm2), cé nach raibh an laghdú seo suntasach (p = 0.304) (Fíor 3O). Ina theannta sin, laghdaíodh an limistéar créachta sa ghrúpa cóireála AG1+ beagán (2.4 mm2), agus níor laghdaigh an chréacht a caitheadh ​​le cóiriú Ag1++ EDTA/BC an limistéar créachta (2.9 mm2). Chuir salainn ocsaigine AG ath-epithelialization créachtaí atá ionfhabhtaithe le S. aureus biofilm (31%) chun cinn níos mó ná iad siúd a ndéileáiltear leo le cóirithe rialaithe neamh-antimicrobial (12%, p = 0.003) (Figiúr 3p). Léirigh feistis AG1+ (16%, p = 0.903) agus Ag+ 1+ EDTA/BC feistis (14%, p = 0.965) leibhéil athghiniúna epithelial cosúil le rialú.
Chun an éifeacht a bhíonn ag cóiriú airgid ar an maitrís bithfhilm a shamhlú, rinneadh Toto 1 agus SYTO 60 staining iaidíd (Fíor 4). Is lí cille-imperment é Toto 1 is féidir a úsáid chun aigéid núicléasacha eisilteacha a shamhlú go cruinn, atá flúirseach i EPanna na mbithbhreoslaí. Is dath tréscaoilteach cille í an Syto 60 a úsáidtear mar fhritháireamh16. Léirigh breathnuithe ar Toto 1 agus SYTO 60 iaidíd i gcréachtaí a ionaclaithe le bithbhreoslaí de Pseudomonas aeruginosa (Figiúr 4A-D) agus Staphylococcus aureus (Figiúr 4i-L) gur laghdaíodh EPS sa bhithfilm tar éis 3 lá de chóireáil feistis. ina bhfuil salainn ocsaiginithe AG agus AG1 + + EDTA/BC. Laghdaigh cóiriú AG1+ gan comhpháirteanna breise antasubstaintí DNA saor ó chill i gcréachtaí a ionaclú le pseudomonas aeruginosa ach ní raibh siad chomh héifeachtach i gcnuas a bhí ionaclaithe le Staphylococcus aureus.
Íomháú in vivo ar bhithbhreoslaí créachta tar éis 3 lá cóireála le cóiriú rialaithe nó airgid. Íomhánna confocal de Pseudomonas aeruginosa (A - D) agus Staphylococcus aureus (I - L) daite le toto 1 (glas) chun aigéid núicléasacha eisilteacha a shamhlú, cuid de pholaiméirí bithbhreoslaí eisiltigh. Chun aigéid núicléasacha intracellular a dhathú, bain úsáid as SYTO 60 (dearg). aigéid. P. Scanadh micreascópacht leictreon de chréachtaí atá ionfhabhtaithe le pseudomonas aeruginosa (E -H) agus staphylococcus aureus (M -P) bithbhreoslaí tar éis 3 lá cóireála le cóiriú rialaithe agus airgid. Barra scála SEM = 5 µm. Barra scála íomháithe confocal = 50 µm.
Léirigh micreascópacht leictreon scanadh go raibh i bhfad níos lú baictéir ina gcuid créachtaí tar éis 3 lá cóireála le gach gléasadh airgid ag lucha a ionacrú le coilíneachtaí bithbhreoslaí Pseudomonas aeruginosa (Figiúr 4E-H) agus Staphylococcus aureus (Figiúr 4M-P).
Chun measúnú a dhéanamh ar an éifeacht a bhíonn ag cóiriú airgid ar athlasadh créachta i lucha bithbhreoslaithe atá ionfhabhtaithe, bhí codanna de chréachtaí bithbhreoslaithe a ndéileáiltear leo le cóiriú rialaithe nó airgid ar feadh 3 lá daite imdhíonta-cheimiceach ag baint úsáide as antasubstaintí a bhaineann go sonrach le neodrófails agus macrophages. Cinneadh cainníochtúil neodrófails agus macrophages go hinmheánach. Fíochán gránúcháin. Fíor 5). Laghdaigh gach cóiriú airgid líon na neodrófails agus na macrophages i gcréachtaí atá ionfhabhtaithe le Pseudomonas aeruginosa i gcomparáid le cóiriú rialaithe neamh-antimicrobial tar éis trí lá cóireála. Mar sin féin, mar thoradh ar chóireáil leis an gcóiriú salainn airgid ocsaiginithe bhí laghdú níos mó ar neutrophils (p = <0.0001) agus macrophages (p = <0.0001) i gcomparáid le cóirithe airgid eile a tástáladh (Figiúr 5i, j). Cé go raibh tionchar níos mó ag Ag1++ EDTA/RC ar bhithbhreoslaí créachta, laghdaigh sé leibhéil neutrophil agus macrophage go pointe níos lú ná an chóiriú Ag1+. Breathnaíodh créachtaí measartha atá ionfhabhtaithe le S. aureus biofilm freisin tar éis cóiriú le Ag (p = <0.0001), Ag1+ (P = 0.0008) agus ag1 ++ EDTA/BC (P = 0.0043) Oxisols i gcomparáid le rialú. Breathnaítear ar threochtaí comhchosúla le haghaidh neutropenia. Bindealán (Fíor 5K). Mar sin féin, níor léirigh ach an chóiriú salainn Ocsaiginithe ag laghdú suntasach ar líon na macrophages i bhfíochán gránúcháin i gcomparáid le rialú i gcréachtaí atá ionfhabhtaithe le S. aureus biofilms (P = 0.0339) (Figiúr 5L).
Rinneadh neutrophils agus macrophages a chainníochtú i gcréachtaí atá ionfhabhtaithe le pseudomonas aeruginosa agus staphylococcus aureus bithbhreoslaí tar éis 3 lá cóireála le rialú neamh-antimicrobial nó cóirithe airgid. Rinneadh neutrophils (AD) agus macrophages (EH) a chainníochtú i gcodanna fíochán a bhí daite le hantasubstaintí a bhaineann go sonrach le neodrófails nó macrophages. Cainníochtú neutrophils (I agus K) agus macrophages (J agus L) i gcréachtaí atá ionfhabhtaithe le Pseudomonas aeruginosa (I agus J) agus Staphylococcus aureus (K & L) bithbhreoslaí. N = 12 in aghaidh an ghrúpa. Taispeánann graif an earráid +/- caighdeánach, luachanna suntasachta i gcomparáid le cóiriú rialaithe neamh-antaibictéarach, * ciallaíonn p = <0.05, ** ciallaíonn p = <0.01; *** ciallaíonn p = <0.001; léiríonn p = <0.0001).
Rinneamar measúnú ansin ar an éifeacht a bhí ag cóiriú airgid ar leigheas neamhspleách ar ionfhabhtú. Déileáladh le créachtaí neamh-ionfhabhtaithe le cóiriú rialaithe neamh-antimicrobial nó le cóiriú airgid ar feadh 3 lá (Figiúr 6). I measc na gcóirithe airgid a tástáladh, ní raibh ach créachtaí a cóireáladh leis an gcóiriú salainn ocsaiginithe níos lú ar íomhánna macrascópacha ná créachtaí a ndéileáiltear leo leis an rialú (Figiúr 6A-D). Léirigh cainníochtú an limistéir chréachta ag baint úsáide as anailís histeolaíoch gurbh é an meánlimistéar créachta tar éis cóireála leis an gcóiriú AG Oxysols ná 2.35 mm2 i gcomparáid le 2.96 mm2 do chréachtaí a ndéileáiltear leo leis an ngrúpa rialaithe, ach níor shroich an difríocht seo tábhacht staitistiúil (p = 0.488) (FIG) (FIG) (FIG) (FIG) (FIG) (Fíor 6i). I gcodarsnacht leis sin, níor breathnaíodh aon laghdú ar limistéar créachta tar éis cóireála le Ag1+ (3.38 mm2, p = 0.757) nó ag1++ EDTA/BC (4.18 mm2, p = 0.054) i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe. Breathnaíodh athghiniúint mhéadaithe epithelial leis an gcóiriú Ag oxysol i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe (30% vs. 22%, faoi seach), cé nár éirigh leis seo tábhacht (p = 0.067), tá sé seo suntasach go leor agus dearbhaíonn sé torthaí roimhe seo. Cuireann cóiriú le oxysols ath-epithelialization chun cinn. -Créachtaí neamhthionnaithe17. I gcodarsnacht leis sin, ní raibh aon éifeacht ag cóireáil le cóiriú Ag1+ nó AG1++ EDTA/BC nó léirigh sé ath-epithelialization laghdaithe i gcomparáid le rialú.
Éifeacht an chóirithe créachta airgid ar leigheas créachta i lucha neamhthógtha le hathdhéanamh iomlán. (AD) íomhánna macrascópacha ionadaíocha de chréachtaí tar éis trí lá cóireála le cóiriú rialaithe neamh-antimicrobial agus cóiriú airgid. (Eh) rannóga créachta ionadaíocha atá daite le hematoxylin agus eosin. Ríomhadh cainníochtú limistéar créachta (I) agus céatadán na reepithelialization (j) ó rannóga histeolaíochta ag lárphointe na créachta ag baint úsáide as bogearraí anailíse íomhá (n = 11–12 in aghaidh an ghrúpa cóireála). Taispeánann graif an earráid +/- caighdeánach. * ciallaíonn sé p = <0.05.
Tá stair fhada úsáide ag Silver mar theiripe fhrithmhiocróbach i gcneasú créachta, ach d'fhéadfadh difríochtaí in éifeachtúlacht fhrithmhiocróbach a bheith mar thoradh ar na foirmlithe agus na modhanna seachadta éagsúla. Thairis sin, ní thuigtear go hiomlán airíonna antasubstaintí na gcóras sonrach seachadta airgid. Cé go bhfuil an fhreagairt imdhíonachta óstach sách éifeachtach i gcoinne baictéir phlanctóin, níl sé chomh héifeachtach i gcoitinne i gcoinne bithbhreoslaí19. Tá baictéir phlanctóineacha go héasca ag macrophages, ach laistigh de bhithbhreoslaí, bíonn fadhbanna breise ag cealla comhiomlánaithe trí an fhreagairt óstach a theorannú sa mhéid gur féidir le cealla imdhíonachta apoptosis a dhéanamh agus tosca proinflammatory a scaoileadh chun an freagra imdhíonachta20 a fheabhsú. Tugadh faoi deara gur féidir le roinnt leukocytes dul isteach i mbithbhreoslaí21 ach nach bhfuil siad in ann baictéir fagaicítí a dhéanamh nuair a bhíonn an chosaint seo i gcontúirt22. Ba chóir cur chuige iomlánaíoch a úsáid chun tacú leis an bhfreagairt imdhíonachta óstach i gcoinne ionfhabhtaithe bithbhreoslaí créachta. Is féidir le díbirt chréachta cur isteach go fisiciúil ar an mbithfilm agus an chuid is mó den bhithbhreoslú a bhaint, ach d'fhéadfadh an fhreagairt imdhíonachta óstach a bheith neamhéifeachtach i gcoinne an bhithbhreoslaí atá fágtha, go háirithe má chuirtear isteach ar an bhfreagra imdhíonachta óstach. Dá bhrí sin, is féidir le teiripí frithmhiocróbacha amhail cóiriú airgid tacú leis an bhfreagairt imdhíonachta óstach agus deireadh a chur le hionfhabhtuithe bithbhreoslaí. Is féidir le comhdhéanamh, tiúchan, tuaslagthacht agus foshraith seachadta tionchar a imirt ar éifeachtacht fhrithmhiocróbach airgid. Le blianta beaga anuas, tá dul chun cinn i dteicneolaíocht próiseála airgid tar éis na cóirithe seo a dhéanamh níos éifeachtaí9,23. De réir mar a théann teicneolaíocht feistis airgid chun cinn, tá sé tábhachtach tuiscint a fháil ar éifeachtacht na gcóirithe seo maidir le hionfhabhtú créachta a rialú agus, níos tábhachtaí fós, tionchar na bhfoirmeacha láidre airgid seo ar an timpeallacht chréachta agus ar leigheas.
Sa staidéar seo, rinneamar comparáid idir éifeachtacht dhá chóiriú airgid ardleibhéil le gnáth -chóirithe airgid a tháirgeann ian AG1+ i gcoinne bithbhreoslaí ag baint úsáide as samhlacha éagsúla in vitro agus in vivo. Rinneamar measúnú freisin ar éifeacht na gcóirithe seo ar an timpeallacht chréachta agus ar leigheas neamhspleách ar ionfhabhtú. Chun tionchar an mhaitrís seachadta a íoslaghdú, bhí gach cóiriú airgid a tástáladh comhdhéanta de charboxymethylcellulose.
Taispeánann ár réamh -mheastóireacht ar na cóirithe airgid seo i gcoinne bithbhreoslaí coilíneachta Pseudomonas aeruginosa agus Staphylococcus aureus, murab ionann agus cóiriú traidisiúnta Ag1+, dhá chóiriú airgid ardleibhéil, ag1++ EDTA/BC agus ag ocsaiginiú ag salts, tá siad éifeachtach ag 5. Cúpla lá. Ina theannta sin, cuireann na cóirithe seo cosc ​​ar athfhoirmiú bithbhreoslaí nuair a nochtann siad arís agus arís eile do bhaictéir phlanctóin. Bhí clóiríd airgid ag an gcóiriú Ag1+, an comhdhúil airgid céanna agus an mhaitrís bonn mar Ag1++ EDTA/BC, agus bhí tionchar teoranta aige ar inmharthanacht baictéarach laistigh den bhithbhreoslaí thar an tréimhse chéanna. An bhreathnú go raibh cóiriú Ag1++ EDTA/BC níos éifeachtaí i gcoinne bithbhreosla ná cóiriú Ag1+ ina bhfuil an mhaitrís chéanna agus tacaíonn cumaisc airgid leis an smaoineamh go bhfuil gá le comhábhair bhreise chun éifeachtacht clóiríd airgid a mhéadú i gcoinne bithbhreoslaí, mar a tuairiscíodh áiteanna eile15. Tacaíonn na torthaí seo leis an smaoineamh go bhfuil ról breise ag BC agus EDTA ag cur le héifeachtacht an chóirithe fhoriomlána agus go bhféadfadh easpa na comhpháirte seo i gcóirithe AG1+ cur leis an teip éifeachtúlacht in vitro a léiriú. Fuaireamar amach gur thaispeáin cóirithe salainn Ocsaiginithe Ag2+ agus AG3+ ian éifeachtúlacht antibacterial níos láidre ná Ag1+ agus ag leibhéil cosúil le Ag1++ EDTA/BC. Mar sin féin, mar gheall ar an bpoitéinseal ard -redox, níl sé soiléir cé chomh fada is a fhanann iain Ag3+ gníomhach agus éifeachtach i gcoinne bithbhreoslaí créachta agus dá bhrí sin is fiú staidéar breise a dhéanamh orthu. Ina theannta sin, tá go leor cóirithe éagsúla ann a ghineann ian AG1+ nár tástáladh sa staidéar seo. Tá na cóirithe seo comhdhéanta de chomhdhúile airgid, tiúchan, agus maitrísí bonn difriúla, a d'fhéadfadh tionchar a bheith acu ar sheachadadh ian AG1+ agus a n -éifeachtúlacht i gcoinne bithbhreoslaí. Is fiú a thabhairt faoi deara freisin go bhfuil go leor samhlacha éagsúla in vitro agus in vivo in úsáid chun éifeachtacht cóirithe créachta a mheas i gcoinne bithbhreoslaí. Beidh tionchar ag an gcineál samhla a úsáidtear, chomh maith le cion salainn agus próitéine na meán a úsáidtear sna samhlacha seo, ar éifeachtacht an chóirithe. Inár samhail in vivo, thugamar cead don bhithfhilm aibí in vitro a aibiú agus ansin é a aistriú chuig dromchla deirmeach na créachta. Tá freagra imdhíonachta na luiche óstach sách éifeachtach i gcoinne baictéir phlanctóin a chuirtear i bhfeidhm ar an gclós, rud a chruthaíonn bithbhreoslaí de réir mar a leigheasann an chréacht. Nuair a chuirtear bithbhreoslaí aibí le créacht srian ar éifeachtacht an fhreagartha imdhíonachta óstach ar fhoirmiú bithbhreoslaí trí chead a thabhairt don bhithbhreos aibí é féin a bhunú laistigh den chréacht sular féidir tús a chur leis. Dá bhrí sin, ceadaíonn ár samhail dúinn measúnú a dhéanamh ar éifeachtacht na gcóirithe frithmhiocróbacha ar bhithbhreoslaí aibí sula dtosaíonn créachtaí ag leigheas.
Fuaireamar amach freisin go raibh tionchar ag feistiú feistis ar éifeachtacht cóirithe airgid ar bhithbhreoslaí in vitro-fhásta agus ar chraiceann muc. Meastar go bhfuil dlúth -theagmháil leis an gclós ríthábhachtach maidir le héifeachtacht fhrithmhiocróbach an chóirithe24,25. Bhí dlúthbhaint ag cóiriú ina raibh salainn Ocsaiginithe AG le bithbhreoslaí aibí, rud a d'fhág go raibh laghdú suntasach ar líon na mbaictéar inmharthana laistigh den bhithfilm tar éis 24 uair an chloig. I gcodarsnacht leis sin, nuair a dhéileáiltear le cóiriú Ag1+ agus AG1++ EDTA/BC, d'fhan líon suntasach de bhaictéir inmharthana. Cuimsíonn na cóirithe seo comhuaimeanna feadh fad iomlán an chóirithe, a chruthaíonn spásanna marbh a chuireann cosc ​​ar dhlúth -theagmháil leis an mbithfilm. Inár gcuid staidéir in vitro, chuir na réimsí neamhtheagmhála seo cosc ​​ar mharú baictéir inmharthana laistigh den bhithfhilm. Ní dhearna muid measúnú ar inmharthanacht bhaictéarach ach amháin tar éis 24 uair an chloig de chóireáil; Le himeacht ama, de réir mar a éiríonn an chóiriú níos sáithithe, d'fhéadfadh go mbeadh spás níos lú marbh ann, ag laghdú an limistéir do na baictéir inmharthana seo. Mar sin féin, leagann sé seo béim ar an tábhacht a bhaineann le comhdhéanamh an chóirithe, ní hamháin an cineál airgid sa chóiriú.
Cé go bhfuil staidéir in vitro úsáideach chun comparáid a dhéanamh idir éifeachtúlacht na dteicneolaíochtaí airgid éagsúla, tá sé tábhachtach freisin tuiscint a fháil ar éifeachtaí na gcóirithe seo ar bhithbhreoslaí in vivo, áit a gcuireann fíochán óstach agus freagairtí imdhíonachta le héifeachtacht na gcóirithe i gcoinne bithbhreoslaí. Breathnaíodh éifeacht na gcóirithe seo ar bhithbhreoslaí créachta ag baint úsáide as micreascópacht leictreon scanadh agus ag smálú EPS an bhithbhreoslaí ag baint úsáide as ruaimeanna DNA intracellular agus extracellular. Fuaireamar amach, tar éis 3 lá de chóireáil, go raibh na cóiriúcháin go léir éifeachtach maidir le DNA saor ó chill a laghdú i gcréachtaí bithbhreoslaí-ionfhabhtaithe, ach ní raibh an chóiriú Ag1+ chomh héifeachtach i gcnuas Staphylococcus aureus-ionfhabhtaithe. Léirigh micreascópacht leictreon scanadh freisin go raibh baictéir i bhfad níos lú i láthair i gcréachtaí a ndéileáiltear leo leis na cóirithe airgid, cé go raibh sé seo níos suntasaí leis an gcóiriú salann AG1++ EDTA/BC i gcomparáid leis an gcóiriú Ag1+. Taispeánann na sonraí seo go raibh céimeanna éagsúla tionchair ag na cóirithe airgid a tástáladh ar struchtúr bithbhreoslaí, ach ní raibh aon cheann de na cóirithe airgid in ann an bithbhreoslaí a dhíothú, ag tacú leis an ngá le cur chuige iomlánaíoch maidir le cóireáil ionfhabhtuithe bithfhilm créachta; BANDBANNA AIRGEADA a úsáid. Déantar an chóireáil roimh an gcóireáil chun an chuid is mó den bhithfhilm a bhaint.
Is minic a bhíonn créachtaí ainsealacha i staid athlasadh dian, agus fanann cealla athlastacha iomarcacha sa fhíochán créachta ar feadh tréimhse fhada ama, ag cruthú damáiste fíochán agus ag ídiú an ocsaigine a theastaíonn le haghaidh meitibileacht cheallach éifeachtach agus feidhm sa chréacht26. Cuireann bithbhreoslaí leis an timpeallacht chréachta naimhdeach seo trí thionchar diúltach a imirt ar leigheas ar bhealaí éagsúla, lena n -áirítear toirmeasc ar iomadú cille agus imirce agus gníomhachtú cytokines proinflammatory27. De réir mar a éiríonn cóiriú airgid níos éifeachtaí, tá sé tábhachtach an tionchar atá acu ar an timpeallacht chréachta agus ar an gcneasú a thuiscint.
Is díol spéise é, cé go raibh tionchar ag gach cóiriú airgid ar chomhdhéanamh bithbhreoslaí, níor mhéadaigh ach cóirithe salainn airgid ocsaiginithe ath-epithelialization na gcneas ionfhabhtaithe seo. Tacaíonn na sonraí seo lenár dtorthaí roimhe seo17 agus le torthaí Kalan et al. .
Leagann ár staidéar reatha béim ar na difríochtaí i dteicneolaíocht airgid idir cóiriú airgid frithmhiocróbach agus tionchar na teicneolaíochta seo ar an timpeallacht chréachta agus ar leigheas neamhspleách ar ionfhabhtú. Mar sin féin, tá na torthaí seo difriúil ó staidéir roimhe seo a thaispeánann gur fheabhsaigh cóiriú Ag1 + + EDTA/BC paraiméadair leighis cluasa coinín gortaithe in vivo. Mar sin féin, d'fhéadfadh sé seo a bheith mar gheall ar dhifríochtaí i samhlacha ainmhithe, amanna tomhais, agus modhanna iarratais baictéarach29. Sa chás seo, tógadh tomhais chréachta 12 lá tar éis gortaithe chun ligean do chomhábhair ghníomhacha an chóirithe gníomhú ar an mbithfilm thar thréimhse níos faide. Tacaítear leis seo le staidéar a léirigh gur mhéadaigh othrais chos atá ionfhabhtaithe go cliniciúil le Ag1 + + EDTA/BC i dtosach i ndiaidh seachtain amháin de chóireáil, agus ansin thar na 3 seachtaine eile de chóireáil le Ag1 + + EDTA/BC agus laistigh de 4 seachtaine ó Úsáid neamh-antimicrobials. drugaí. Cóiriú CMC chun méid na n -ulcers30 a laghdú.
Léiríodh roimhe seo go bhfuil foirmeacha agus comhchruinnithe áirithe airgid in vitro 11, ach ní bhíonn na torthaí in vitro seo i gcónaí ina n -éifeachtaí díobhálacha in vivo. Ina theannta sin, mar thoradh ar dhul chun cinn i dteicneolaíocht airgid agus tuiscint níos fearr ar chomhdhúile airgid agus ar chomhchruinnithe i gcóirithe, forbraíodh go leor cóirithe airgid sábháilte agus éifeachtacha. Mar sin féin, de réir mar a théann teicneolaíocht feistis airgid chun cinn, tá sé tábhachtach tuiscint a fháil ar thionchar na gcóirithe seo ar an gcomhshaol créachta31,32,33. Tuairiscíodh roimhe seo go bhfreagraíonn an ráta méadaithe ath-epithelialization do chéatadán méadaithe macrophages frith-athlastacha M2 i gcomparáid leis an feinitíopa M1 athlastach. Tugadh é seo faoi deara i samhail luch roimhe seo inar cuireadh cóiriú créachta hydrogel airgid i gcomparáid le hiodróga sulfadiazine airgid agus neamh-antimicrobial34.
Is féidir le créachtaí ainsealacha athlasadh iomarcach a thaispeáint agus tugadh faoi deara go bhféadfadh sé go mbeadh díobhálacha neodrófails iomarcach dochrach do leigheas créachta35. I staidéar i lucha neutrophil-ídithe, chuir neutrophils moill ar reepithelialization. Mar thoradh ar láithreacht neutrophils iomarcach tá leibhéil arda próitéiní agus speicis ocsaigine imoibríocha, mar shampla sárocsaíd agus sárocsaíd hidrigine, a bhaineann le créachtaí ainsealacha agus cneasaithe mall37,38. Ar an gcaoi chéanna, is féidir le méadú ar líon na macrophage, mura ndéantar é a rialú, cneasú créachta moillithe a bheith mar thoradh air. Tá an méadú seo thar a bheith tábhachtach mura bhfuil macrophages in ann aistriú ó feinitíopa athlastach go feinitíopa pro-leighis, agus mar thoradh air sin teipeann ar chréachtaí an chéim athlastacha de Healing40 a fhágáil. Chonaiceamar laghdú ar neutrophils agus macrophages i gcréachtaí bithbhreoslaí-ionfhabhtaithe tar éis 3 lá cóireála le gach cóiriú airgid, ach bhí an laghdú níos suntasaí le cóiriú salainn ocsaiginithe. D'fhéadfadh an laghdú seo a bheith mar thoradh díreach ar an bhfreagra imdhíonachta ar airgead, freagra ar bhithbhrístí laghdaithe, nó an chréacht a bheith i gcéim níos déanaí de leigheas agus dá bhrí sin laghdaítear cealla imdhíonachta sa chréacht. Má laghdaítear líon na gceall athlastacha sa chréacht is féidir timpeallacht a choinneáil a chabhródh le cneasú créachta. Níl an mheicníocht ghníomhaíochta ar an gcaoi a gcuireann OxySalts cneasú neamhspleách ionfhabhtaithe chun cinn, ach is féidir le cumas Ag oxysals chun ocsaigin a tháirgeadh agus leibhéil dochracha sárocsaíd hidrigine, idirghabhálaí athlasadh a mhíniú, é seo a mhíniú agus éilíonn sé tuilleadh staidéir17.
Is fadhb do dhochtúirí agus d'othair iad créachtaí ionfhabhtaithe neamh-leighis ainsealacha. Cé go n -éilíonn go leor cóirithe éifeachtacht fhrithmhiocróbach, is annamh a dhíríonn taighde ar phríomhfhachtóirí eile a mbíonn tionchar acu ar an micro -chomhshaol créachta. Taispeánann an staidéar seo go bhfuil éifeachtúlacht fhrithmhiocróbach dhifriúil ag teicneolaíochtaí airgid éagsúla agus, go háirithe, éifeachtaí difriúla ar an timpeallacht chréachta agus leigheas, neamhspleách ar ionfhabhtú. Cé go dtaispeánann na staidéir in vitro agus in vivo seo éifeachtúlacht na gcóirithe seo maidir le hionfhabhtuithe créachta a chóireáil agus cneasú a chur chun cinn, tá gá le trialacha rialaithe randamaithe chun éifeachtacht na gcóirithe seo sa chlinic a mheas.
Tá na tacair shonraí a úsáidtear agus/nó anailís a dhéanamh orthu le linn an staidéir reatha ar fáil ón údar comhfhreagrach ar iarratas réasúnach.


Am Post: Iúil-15-2024